【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽(yáng)性對(duì)照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對(duì)照:Ct值>38或無(wú)Ct值,線形為直線或輕微斜線,無(wú)指數(shù)增長(zhǎng)期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽(yáng)性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,則判定為陽(yáng)性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無(wú)Ct值。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號(hào) | BJP6340 |
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【運(yùn)輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購(gòu)本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽(yáng)性對(duì)照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專門的區(qū)域操作。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
訂購(gòu)流程:
通過(guò)在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
4-羥基-3-苯甲酸甲酯Mycobacterium bovis 牛結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體規(guī)格:100 ul
3-羥基-2-硝基吡啶CK12/Cytokeratin 12 細(xì)胞角蛋白12抗體規(guī)格:100 ul
3-羥基-2-硝基吡啶HE4/Epididymal secretory protein E4 附睪分泌蛋白4抗體規(guī)格:100 ul
四(三苯基膦)鎳Beta galactosidase β半乳糖苷酶抗體規(guī)格:100 ul
四(三苯基膦)鎳NR2C2/TAK1 孤兒核受體TAK1抗體規(guī)格:300 ul
2,6-二氟吡啶Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端規(guī)格:100 ul
2,6-二氟吡啶Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端規(guī)格:5 mg
2,6-二氟吡啶Capsid protein VP1 大鼠細(xì)小病毒H-1株(H-1)抗體(N端)規(guī)格:1 vial
4-溴-2-(三氟甲基)苯甲醚CRLF2 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體規(guī)格:100 ul
4-溴-2-(三氟甲基)苯甲醚ASB10 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體規(guī)格:100 ul
N-芐氧羰基-L-纈氨?;?L-酪氨酸甲酯MARK4 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體規(guī)格:100 ul
4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑phospho-MARK4(Ser423) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體規(guī)格:100 ul
4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體規(guī)格:100 ug
(S)-(+)-2-氨基-4-溴丁酸鹽IgHV/IgH 免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體規(guī)格:100 ul
(S)-(+)-2-氨基-4-溴丁酸鹽Mammaglobin A 珠蛋白1抗體規(guī)格:100 ul
Zinquin Ethyl EsterADK/AK 腺苷酸激酶抗體規(guī)格:100 ul
無(wú)水氘代乙醇(Isotopic)AEG-1/LYRIC AEG-1抗體規(guī)格:100 ul
二(乙酰丙酮)鉑(II)AMH/MIS Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體規(guī)格:100 ul
番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)Apx基因探針?lè)≒CR試劑盒APC蛋白免疫共沉淀分析試劑盒RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維甲酸受體-β抗原C32H50O5
AP-NPP底物顯色試劑盒Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA KitC48H76O21
AP標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2,AT2R ELISA Kit C60H100O29
AP標(biāo)記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液Human transthyretin,TTR ELISA KitC23H26O11
AP底物pNPP緩沖溶液Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA KitC20H22N2O
AP反應(yīng)終止緩沖液Human scavenger receptor B,SRB ELISA KitC12H12O2
AP生物素穩(wěn)定/稀釋溶液Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA KitC58H94O27
ATP酶法冰凍切片動(dòng)物肌肉組織分型染色試劑盒Mouse toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA KitC21H20O11