實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 | phospho-CDK5(Tyr15) | BJ-K7859 |
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過(guò)程:
1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗血清實(shí)際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補(bǔ)體,結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過(guò)胎盤,保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識(shí)別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過(guò)敏性體質(zhì)的人血清中可檢測(cè)到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲(chóng)感染。
ZIP4 aibody68 kDa Q6P5W5Human, Mouse
ZIP7 aibody50 kDa and 56 kDa Q92504Human, Mouse, Rat
ZIP8 aibody53 kDa, 75-90 kDa Q9C0K1Human, Mouse, Rat
ZIPK-Phospho 311Ser aibody65 kDa O43293Human, Mouse
ZKSCAN1 aibody62 kDa P17029Human, Mouse
ZKSCAN3 aibody24 kDa Q9BRR0Human
ZMAT2 aibody32 kDa Q96NC0Human, Rat
ETS相關(guān)蛋白71抗體 別 名 ER71; Ets rated protein 71; ETS translocation varia 2; Ets varia gene 2; Ets-rated protein 71; ETSRP71; ETV2_HUMAN.
外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體 別 名 Ectodermal dysplasia 1, anhidrotic; Ectodermal dysplasia protein; Ectodermal dysplasia, anhidrotic (hypohydrotic); Ectodysplasin A; Ectodysplasin A, membrane form; Ectodysplasin A, secreted form; ECTODYSPLASIN A1 ISOFORM; ECTODYSPLASIN A2 ISOFORM; ECTODYSPLASIN; Ectodysplasin-A; ED1 A1; ED1 A2; ED1; ED1 GENE; Eda A1; Eda A2; eda; EDA protein; EDA protein homolog; EDA_HUMAN; EDA1; EDA1 GENE; EDA2; HED; ODT1; Oligodoia 1; secreted form; STHAGX1; Ta; Tabby; Tabby protein; X linked anhidroitic ectodermal dysplasia protein; XHED; XLHED.
硫酸軟骨素蛋白多糖3抗體 別 名 Dermatan sulfate proteoglycan 3; DSPG3; Epiphycan; epiphycan proteoglycan; EPYC; EPYC_HUMAN; Pg Lb; PG-Lb; PGLB; Proteoglycan-Lb; SLRR3B; Small chondroitin/dermatan sulfate proteoglycan.
磷酸化周期素依賴性激酶5抗體Halomonas│sp.分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 38生長(zhǎng)條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Knoellia│sinensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 832生長(zhǎng)條件: 30℃真空冷凍干燥法
Lactobacillus│delbrueckii subsp. bulgaricus分離基物: 發(fā)酵劑提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no發(fā)酵酸奶。培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 42℃真空冷凍干燥法
Salinibacterium│amurskyense分離基物: 土壤/海沙提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no微生物/耐冷培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 5℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Clostridium│perfringens提供形式: 其他安全等級(jí): 3模式株: no培養(yǎng)基: CM0121生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法
Lactobacillus│plaarum分離基物: 泡菜(蘿卜)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no發(fā)酵生產(chǎn)泡菜、果蔬制品、青貯飼料、谷物制品、香腸、酸面包等。培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法;定期移植法
Pleurotus│ostreatus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃
Rhodobacter│sphaeroides分離基物: 液提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no微生物飼料培養(yǎng)基: 259生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Micromonospora│sp.分離基物: 沼澤土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no抗細(xì);抗金黃色葡萄球培養(yǎng)基: CM0012生長(zhǎng)條件: 35-37C真空冷凍干燥