實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | IL-23 elisa試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | IL-23 elisa Kit |
貨號 | GOY-H7637 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
小鼠雜交瘤細胞(抗人β-HCG);CBB1ErbB-3/HER3 表皮生長因子受體3抗體1 Kit
小鼠雜交瘤細胞(抗人α-HCG);CBA1phospho-EGFR (Tyr1197) 磷酸化表皮生長因子受體抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗人卵巢癌);OC1C3phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生長因子受體抗體1 Kit
小鼠雜交瘤細胞(抗P185erbB-1);A18phospho-EGFR (Thr678) 磷酸化表皮生長因子受體抗體1 Kit
小鼠雜交瘤細胞(抗P185erbB-2);A21phospho-EGFR (Ser768) 磷酸化表皮生長因子受體抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗P185erbB-2);A22phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生長因子受體抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗小鼠CD4);GK1.5phospho-EGFR (Ser1142) 磷酸化表皮生長因子受體抗體20 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗小鼠Lyt2.2);2.43phospho-EGFR (Ser967) 磷酸化表皮生長因子受體抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗小鼠巨噬細胞);F4/80EGF 表皮生長因子抗體(大鼠)100 ul
小鼠雜交瘤細胞;PK136EGFL7 類表皮生長因子域7抗體20 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗HLA-A2);BB7.2MUC13 粘蛋白13抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗人肺腺癌);LC-1-201EGFR 表皮生長因子受體抗體20 ul
小鼠雜交瘤細胞(抗人肺腺癌);LC-1-202MUC15 粘蛋白15抗體1 Kit
小鼠雜交瘤細胞(抗人肺腺癌);LC-2-01EF1a 翻譯延伸因子EF-1a抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞CD25;PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體100 ul
中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]Egr1 早期生長應(yīng)答蛋白1抗體20 ul
小鼠雜交瘤細胞;AE-1MUC7 粘蛋白7抗體100 ul
小鼠雜交瘤細胞;AE-2CDCP1/CD318 CD318抗體100 ul
IL-23 elisa試劑盒規(guī)格secreted protein acidic and rich in cysteine富含半胱氨酸型酸性蛋白種屬: Trametes│palisoti紫椴栓孔菌(密褶孔菌)
leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1富亮氨酸α2糖蛋白1種屬: Erythrobacter│gangjinensis赤細菌(加詞待譯)
Serca鈣泵種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3F Δ1-156
voltage-gated calcium channel鈣離子通道抗體種屬: Cladosporium│corchori Z. Y. Zhang et T. Zhang黃麻枝孢
calmodulin鈣調(diào)素;鈣調(diào)蛋白種屬: Candida│suecica瑞典假絲酵母
calcium;calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2種屬: Leptosphaeria│sp.小球腔菌
Calreticulin鈣網(wǎng)蛋白種屬: Phomopsis│amygdaliana核果果腐擬莖點菌
Calprotectin鈣衛(wèi)蛋白種屬: Actinoplanes│sp.游動放線菌菌屬
Glycyl proline dipeptidyl aminopeptidase甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶種屬: Pandoraea│sputorum痰潘多拉菌
Glycine N-methyltransferase甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶種屬: Fusarium│oxysporum f.sp. lini W.C. Snyder & H.N. Hansen尖孢鐮刀菌胡麻?;?/span>
Mannose Associated Serine Protease 2甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶-2種屬: Actinoplanes│sichuanensis sp. nov.四川游動放線菌
mannan binding lectin associated serine protease甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶種屬: Bacillus│thuringiensis subsp. silo蘇云金芽孢桿菌錫盧亞種
Mannma binding protein;mannan binding lectin甘露糖結(jié)合蛋白;甘露糖結(jié)合凝集素種屬: Corynebacterium│marinum海洋棒桿菌
mannose receptor甘露糖受體種屬: Halomonas│alkaliantarctica耐堿南極鹽單胞菌
glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase甘油醛-3-磷酸脫氫酶種屬: Alishewanella│fetalis胎兒別樣謝萬氏菌
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。