具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
產(chǎn)品名稱:MVIgM elisa試劑盒廠家
英文名稱:MVIgM elisa Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。?
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
吉馬酮(標準品)Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb2-羥基-6-萘甲酸
加蘭他敏(標準品)Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb2-硝基-甲砜
甲基蓮心(標準品)IP6K3 (D9O7J) Rabbit mAb硫氫化鈉
5-O-甲基維斯阿米苷(標準品)RACK1 (D59D5) Rabbit mAb異基肼鹽酸鹽
N-甲基野靛(標準品)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb5-硝基吲哚-2-羧酸酯
9-甲氧基喜樹(標準品)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb氧基酮
10-姜酚(標準品)FastScan™ Phospho-Akt1 (Ser473) ELISA Kit酸
6-姜酚(標準品)RF2IP (D9H4) Rabbit mAb基三基化膦
8-姜酚(標準品)Jagged1 (D4Y1R) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)環(huán)戊基異酸酯
姜酮(標準品)EGF Receptor (D1D4J) XP® Rabbit mAb (Neutralizing)(S)-羥基哌啶鹽酸鹽
姜酮(標準品)EGF Receptor (D1D4J) XP® Rabbit mAb (Neutralizing)(S)-1-N-叔丁氧羰基-2-(氨基基)哌啶
6-姜酚(標準品)FoxM1 (D12D5) XP® Rabbit mAb2-酰酸甲酯
絞股藍皂苷XLIX(標準品)FoxM1 (D12D5) XP® Rabbit mAbN-甲基-1,2-二
YM-201636MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb2,2-二羥甲基酸
金石蠶苷(標準品)ERCC1 (D61F5) Rabbit mAb1-萘甲
金絲桃苷(標準品)Phospho-Histone H2A.X (Ser139/Tyr142) Antibody2-
京尼平(標準品)SKAR α/β (D65E8) XP® Rabbit mAb五甘
阿非迪霉素;艾菲地可寧LRP5 (D5G4) Rabbit mAb1,8-二氨基萘
MVIgM elisa試劑盒廠家黃芩苷;黃芩甙 21967-41-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
酸卡那 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
甲喹 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg;99.7%
磺胺吡嗪鈉 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
(酸)卡那 標準品 訂購|咨詢 規(guī)格: 150mg
知母皂苷E;Anemarsaponin 136565-73-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
異丁酰紫草素;Isobutyrylshi 52438-12-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
銀杏酚酸;Ginkgolic acids 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
異蓮心堿;Isoliensinine 6817-41-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
異槲皮素;Isoquercitrin 216375 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
旋復花內(nèi)酯;Britannilacton 33627-41-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
仙茅苷;Curculigoside 85643-19 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
吳茱萸新堿;Evocarpine 15266-38-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
塔拉薩敏;Talatisamine 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
四氫姜黃素; Tetrahydrocuc 36062-04-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg