具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
產(chǎn)品名稱:鴨生長(zhǎng)激素1(GH1)elisa試劑盒
英文名稱:Duck growth hormone growth hormone 1,GH1 ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
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操作流程如下:
(1)僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過(guò)猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
鑭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Annexin A2 (D11G2) Rabbit mAb (PE Conjuga)哌啶基哌啶
鑭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10% HCl)CTLA-4 (D4E9I) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)(R)-(+)-1,1,2-三基-1,2-二2-(醋)酸酯
镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl)HDAC4 (D8T3Q) Rabbit mAb2,2'-二羥基-甲氧基二甲酮
錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基質(zhì):1.0 mol/L HNO3)PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) Rabbit mAb2--甲基-氟甲
錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%硝酸)FAM3C (D1S2D) XP® Rabbit mAb2-溴--5-硝基吡啶
水質(zhì)錳標(biāo)樣(1.0mg/L in H2O,分析標(biāo)準(zhǔn)品)IGF-I Receptor β Blocking Peptide1,2,3,四氫化喹喔啉
錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)SLAMF6/CD352 Antibody2--溴-6-甲基吡啶
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度范圍:0.197(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品)Jarid1B (E2X6N) Rabbit mAb氨基戊烷
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體:5%HCl)DCP1A (D6V1R) Rabbit mAb2,6-二甲基吡啶 N-氧化物
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸)LAG3 (D2G4O™) XP® Rabbit mAb2,2'-亞甲基雙-(叔丁基-基酚)
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)LAG3 (D2G4O™) XP® Rabbit mAb六甘
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)F3/Contactin (D7D4X) Rabbit mAb二二二基
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體: 1%HCl)CD80 (E3Q9V) Rabbit mAb溴-2,6-二甲
水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品)Ron (C81H9) Rabbit mAb (Biotinylad)羧酸甲酯-5-酸
鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)FastScan™ Phospho-HSP27 (Ser82) ELISA KitL-樟腦酸
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3)ANP32A (D7Z5U) Rabbit mAbL-基氨酸
釹標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAb鋇鐵氧體
標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAb反式-2,二溴-2--1,二
鴨生長(zhǎng)激素1(GH1)elisa試劑盒間異酸酯 98%擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)ELISA定量測(cè)定試劑盒吡啶-3-甲 98%姜環(huán)己基異酸酯 98%中腦核仁蛋白抗體脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒乙炔 97%廣藿香4--2-吡啶甲酸 98%肌球蛋白重鏈7抗體直腸腫瘤標(biāo)記K-ras糞便檢測(cè)突變巢式分析試劑盒1-基-2-炔-1- 98%黑芝麻4-吡啶-2-甲酸甲酯 98%肌間蛋白1抗體直腸腫瘤標(biāo)記K-ras糞便檢測(cè)突變熒光分析試劑盒酸 97%磺胺5-噻吩-2-磺酰胺 97%肌間蛋白2抗體直腸腫瘤標(biāo)記波形纖維蛋白糞便檢測(cè)試劑盒2-基吡啶 98%奈韋拉平甲基酯 96%肌球蛋白輕鏈激酶3抗體直接細(xì)胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒雙(*基硅烷基)氨基 1 M in THF (約22%含量)奧美拉唑鈉5-噻吩-2-磺酰 96%肌球蛋白輕鏈激酶2抗體植酸待測(cè)樣品處理試劑盒2-基-3-丁炔-2- 98%L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽2--4-甲氧基吡啶 99%絲裂原活化蛋白激酶3K10抗體植物3-磷酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒3-基吡啶 97%對(duì)硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷