大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：通用型細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒 100次
PROPIDIUM IODIDE細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒 100次
CHROMOMYCIN A3細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒 50次
HOECHST 33342和PROPIDIUM IODIDE細(xì)胞膜變檢測(cè)試劑盒 50次
TUNEL流式細(xì)胞儀分析試劑盒 10次
動(dòng)物細(xì)胞/組織C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒 10次
植物C釋放凋亡
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細(xì)胞 |
貨號(hào) | GOY-01X1268 |
商品介紹：
名稱 大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞（MEC）在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比，對(duì)參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。 5.方法簡(jiǎn)介： ()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： ()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R196 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
50T 馬皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5mL 乳腺上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
250mL Antigen Retrieval Reagent，5X Antigen Retrieval Reagent，5X 常溫保存
50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)（250-15000bp） DNAMETER 4℃保存
2 ug pGET-4T-2 pGET-4T-2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
肉湯培養(yǎng)基I Broth medium ?嵌?L?
大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞含225ml LB1肉湯均質(zhì)袋 英文名稱：LB1 Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒*直銷
萘啶酮酸（5.0mg） 英文名稱：Nalidixic Acid 產(chǎn)品規(guī)格：5.0mg/支*5 豬三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
含225ml FB1增菌液均質(zhì)袋 英文名稱：FB1 Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B) 英文名稱：FB1 additive(A、B) 產(chǎn)品規(guī)格：2ml/支*40 豬乳酸脫氫(LDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋 英文名稱：GN Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫試劑盒*直銷
含100ml GN增菌液均質(zhì)袋 英文名稱：GN Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 英文名稱：Shigella Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
含225ml7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 英文名稱：7.5% NaCl Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 英文名稱：7.5% NaCl Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬去乙酰化饑餓激素(dGHRL)免疫試劑盒*直銷
含225ml10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋 英文名稱：10% NaCl Trypticase Soy Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包 豬去素(NE)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
