實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
產品名稱 | 小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Small Tailed Han sheep Proopiomelanocortin,POMC ELISA kit |
貨號 | GOY-S74918 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
釹標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)FastScan™ Total Zap-70 ELISA Kit2--吡啶
標準溶液(100µg/mL,基體:1%HCl)Wnt5a Antibody5-溴-6-煙酸甲酯
標準溶液(1000μg/ml,,溶劑:水)PDE5 Antibody5-溴-2-煙酸甲酯
鐠標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)MBP Tag (8G1) Mouse mAb4,4'-二酰聯
硒標準溶液(100mg/L,溶劑:水)PhosphoPlus® ULK1 (Ser757) Antibody Duet氨基-基吡啶
鍶標準溶液(1000μg/ml)Vav3 Antibody2,二
鈦標準溶液(100µg/ml)Rap1A/Rap1B (26B4) Rabbit mAb1-(2-氟-5-基)-1-酮
鎢標準溶液(1000μg/ml,基體:0.1mol/LNaOH)Synip (C51G6) Rabbit mAb5-羥基-1,二
鉭標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody2-溴噻吩-5-甲
碲標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) AntibodyN-甲基-2-甲氧基芐
鋱標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)HSP27 (G31) Mouse mAb2-氟-6-溴
釩標準溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)HSP27 (G31) Mouse mAb6-溴吲唑
釔標準溶液(1000μg/ml in 10% HCl)BCAR3 Antibody異基酸
鋅標準溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) AntibodyN-CBZ-哌啶酸酯
鋅標準溶液(100µg/ml,,基體:1%HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) Antibody氨基基酸
化鋅標準溶液(0.1000mol/L)Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody2-氨基-氟
鄰二甲(for HPLC,≥96.0% (GC))Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody5-溴-2-甲氧基甲
蚜滅標準溶液(0.100mg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody II7-羥基-1H-吲唑
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa試劑盒溴乙酸芐酯 96%粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體基乙?;?98%阿古尼嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒溴乙酸 CP,98.0%粘蛋白4抗體5-基酞 97%副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒溴乙酸 AR,98.5%(GC)v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體2- 99%壞死梭桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒溴乙酸 分析標準品基質金屬蛋白酶-10抗體2--3-甲基吡啶 98%擬枝孢鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒溴乙酸 Standard for GC,≥99.5% (GC)突變型P53抗體2-甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡啶鹽酸鹽 98%梨孢鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒1,2-二溴烷 99%蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體環(huán)胺 98%藍氏賈第鞭毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒2-溴異丁酸乙酯 98%基質金屬蛋白酶-24抗體環(huán)基 98%地霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒氧氟沙星 分析標準品,≥99.0% (HPLC)巨噬細胞甘露糖受體抗體4--4'-氟丁 97%禽嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規(guī)范品的數量決議所需的板條數。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。