實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | IFN-α elisa試劑盒廠家 |
英文名稱 | IFN-α elisa Kit |
貨號(hào) | GOY-H7395 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
紫花臉A4GALT/CD77 α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1100 ul
繡球菌Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體100 ul
火針層孔菌(斜面)Blood Group Kell Antigen/CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體100 ul
果生鏈核盤(pán)菌(斜面)Blood Group Lewis a 血型Lewis a抗體100 ul
蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種DARC/CD234 Duffy血型趨化因子受體抗體1 Kit
彩絨革蓋菌(斜面)Galactosidase alpha α-半乳糖苷酶抗體100 ul
尖孢鐮刀菌番茄專化型Ankyrin erythroid 紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體100 ul
果生鏈核盤(pán)菌PPM1F 鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶磷酸酶抗體100 ul
枯草芽孢桿菌 BRIP3 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體100 ul
蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病RIP5/RIPK5 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶5抗體100 ul
蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種SPHK2 鞘氨醇激酶2抗體100 ul
發(fā)根農(nóng)桿菌STK3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3抗體100 ul
猴頭菌(斜面)IKIP IKK激酶相互作用蛋白抗體100 ul
葡萄座腔菌屬(斜面)AMACR/P504S α-甲基?;o酶A消旋酶抗體100 ul
蟬花1-4(蟬擬青霉)(斜面)C3/MLN51 腫瘤易感候選基因3抗體100 ul
裂殖酵母phospho-IKKi/IKKe(Thr500) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體100 ul
茄腐鐮刀菌TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體100 ul
厚垣普奇尼亞菌Cipar1 前列腺雄激素抑制信號(hào)蛋白1抗體20 ul
IFN-α elisa試劑盒廠家嘧磺隆;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 90982-32-4 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
甲磺胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 7317-1 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
a-;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 5103-71-9 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
三酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 513665-7 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
異柳磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 25311-71-1 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
單;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 29547-00-0 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
霜脲氰;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 57966-95-7 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
維生素K3;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 587-5 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 29102 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 1g
四氫表小檗堿 38853-67-7 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
麥冬內(nèi)酯A 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
山茶甙B 131573-90-5 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
蝙蝠葛諾林堿 2831-75-6 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
SN2310 850728-18-6 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
環(huán)巴胺 4449-51-8 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。