單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
銜接蛋白β抗體 | AP2 beta | BJ-K6725 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
TLR11 Toll樣受體11酰基輔酶A結合結構域蛋白64-(4-嗎啉代)胺Mouse GAPDH (Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) 檢測試劑盒
Thrombomodulin 血栓調節(jié)蛋白氨基?;?4-(4-嗎啉代)胺Mouse DNM1 (Dynamin 1) 檢測試劑盒
GDNF Receptor alpha 2 膠質細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2脂肪甘油三酯脂酶4-(4-嗎啉代)胺Mouse DMD (Dystrophin) 檢測試劑盒
Tenascin C (C terminal) 細胞粘合素(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α12,2,4-*基-1,3-戊二單異丁酸酯Mouse SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) 檢測試劑盒
Tenascin C/-C 細胞粘合素(固生蛋白)雙調蛋白(結腸直腸細胞源性生長因子)2,2,4-*基-1,3-戊二單異丁酸酯Mouse EGR1 (Early Growth Response Protein 1) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α單克隆磷酸化水通道蛋白2庚酰氯Mouse EGR2 (Early Growth Response Protein 2) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α粘附相關激酶庚酰氯Mouse EGR3 (Early Growth Response Protein 3) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α磷酸化粘附相關激酶(全氟己基)乙烯Mouse EGR4 (Early Growth Response Protein 4) 檢測試劑盒
顆粒溶素Monkey EAR2 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) 檢測試劑盒
腦膠質瘤相關蛋白(鋅指蛋白5)Monkey ABCG2 (ATP Binding Cassette Transporter G2) 檢測試劑盒
生長調節(jié)致癌基因gamma(GROγ)Monkey UBAP2 (Ubiquitin Associated Protein 2) 檢測試劑盒
G蛋白信號調節(jié)蛋白2Monkey IL-23 (Ierleukin 23) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白Monkey RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) 檢測試劑盒
調節(jié)蛋白GAL4Monkey REN (Renin) 檢測試劑盒
配子生成素結合蛋白1Monkey PLP1 (Proteolipid Protein 1, Myelin) 檢測試劑盒
鋅指蛋白403/喉癌相關蛋白1Monkey CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) 檢測試劑盒
銜接蛋白β抗體Penicillium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no活性物質,人白細胞彈性蛋白酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C-80℃冰箱凍結;礦物油法;定期移植法
Corynebacterium glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no生產(chǎn)谷氨酸。培養(yǎng)基: 谷氨酸培養(yǎng)基:蛋白胨10.0g,10.0g,5.0g,葡萄糖1.0g,瓊脂20g,蒸餾水1L,pH6.8-7.0,121℃,15min。生長條件: 30℃,好氧真空冷凍干燥法
Bacillus│aquatilis分離基物: 油田水樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no微生物采油培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 2模式株: no致病芯片研發(fā)培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結法
Bacillus│thuringiensis分離基物: 草魚腸胃道提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no飼料用植酸酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Streptomyces│fradiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no產(chǎn)生Neomycin新霉素培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C真空冷凍干燥
Micromonospora│chalcea提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no代謝產(chǎn)物具有抗活性。培養(yǎng)基: 0027生長條件: 28℃液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
Ferroplasma│thermophilium分離基物: 礦坑水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no硫化礦微生物浸出培養(yǎng)基: 815生長條件: 45℃真空冷凍干燥法
Mucor│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法