適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。
2.標本結(jié)果判定：
（1）陽性：標本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
（2）可疑：標本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時應對標本進行重復檢測，如重復實驗結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：紫河車LAMP鑒定試劑盒供應商
英文名稱：Placenta hominis
貨號：YSP9475
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
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實驗過程：
一、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
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PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
ANG- II (Human angioension II ) ELISA Ki 人血管緊張素Ⅱ化汞 ACS（劇品）三羥基烷 98%Ehrlichiae spp.
ANG- I R(Human angioension I recepor Anibody) ELISA Ki 人血管緊張素Ⅰ受體抗體化汞 AR,99.5%（劇品）6-姜烯酚 分析標準品，≥90%Eikenella corrodens
Ang- I ELISA Ki 大鼠血管緊張素Ⅰ化汞 CP,99.0%（劇品）8-姜酚 分析標準品，≥95%Eimeria spp.
Ang- I (Mouse angioension I ) ELISA Ki 小鼠血管緊張素Ⅰ酸汞 AR,98.5%（劇品）10-姜酚 分析標準品，≥96%Elaeophora schneideri
ANG ELISA Ki 大鼠血管生長素酸汞 CP,98.0%（劇品）10-姜酚 95%Emmonsia parva
ANF(Human arial nariureic facor) ELISA Ki 人心納素酸汞 GR,99.0%（劇品）6-姜酚 分析標準品，≥98%Encephaliozoon spp.
androgen ElISA Ki 大鼠雄激素紅色 AR,99.5%（劇品）染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)Enamoeba hisolyica
ANA(Human ani-nucleolus anibody) ELISA Ki 人抗核仁抗體黃色 AR,99.5%（劇品）番瀉苷C 99%Enamoeba spp.
ANA(Human Ani-nuclear Anibody) ELISA Ki 人抗核抗體酸汞 AR,98.0%（劇品）鉿粒 99.9% meals basis，1-10mmEneric Adenovirus41
ANA(Human ani-neurophil anibody) ELISA Ki 人抗中性粒細胞抗體 AR,99.5%（劇品）鈮粉 99.5%,200目Enerinvasive E.coli(EIEC)
紫河車LAMP鑒定試劑盒供應商Mouse Anpep(Aminopepidase N) ELISA Ki培養(yǎng)基Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Ndnf(Proein NDNF) ELISA Ki木糖發(fā)酵管Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Kap(Kidney androgen-regulaed proein) ELISA Ki鼠李糖發(fā)酵管Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse IGFBP-7(Insulin-like growh facor-binding proein 7) ELISA KiFraser 肉湯增菌液基礎(chǔ)Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Prnp(Major prion proein) ELISA Ki吖啶黃Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Gypa(Glycophorin-A) ELISA Ki萘啶酮酸Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Klk1b22(Kallikrein 1-relaed pepidase b22) ELISA Ki檸檬酸鐵銨溶液Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Nfkb2(Nuclear facor NF-kappa-B p100 subuni) ELISA Ki吖啶黃Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse B4gal1(Bea-1,4-galacosylransferase 1) ELISA Ki萘啶酮酸Sandwich ELISA, Double Anibody
Mouse Crry(Complemen regulaory proein Crry) ELISA Ki李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基Sandwich ELISA, Double Anibody
