【運輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽性對照。使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專門的區(qū)域操作。 ?
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號 | BJP6840 |
訂購流程:
通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標本結(jié)果判定:
(1)陽性:標本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標本進行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
4,6-二氯-5-嘧啶甲醛TMEM166 跨膜蛋白166抗體規(guī)格:100 ug
4-氨基-6-氯嘧啶mt 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體規(guī)格:100 ul
4-氨基-6-氯嘧啶TOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體規(guī)格:100 ul
可的松TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體規(guī)格:20 ul
可的松phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 磷酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體規(guī)格:100 ul
2-硝基-1,4-二胺TPH/Trptophan Hydroxylase 色氨酸羥化酶抗體規(guī)格:1 Kit
2-硝基-1,4-二胺phospho-TPH(Ser260) 磷酸化色氨酸羥化酶抗體規(guī)格:100 ul
2-硝基-1,4-二胺phospho-TPH(Ser19) 磷酸化色氨酸羥化酶抗體規(guī)格:100 ul
2,3,4,6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖TPO 甲狀腺過氧化物酶抗體規(guī)格:300 ul
2,3,4,6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖TRA16 激素受體相關(guān)蛋白16抗體規(guī)格:100 ul
2,3,4,6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖TRA16 激素孤兒受體相關(guān)蛋白抗體規(guī)格:20 ul
N-乙基TRADD 腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體規(guī)格:60 ul
N-乙基phospho-TRADD(Ser299) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體規(guī)格:100 ul
β-四氫萘酮phospho-TRADD(Ser269) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體規(guī)格:1Kit
β-四氫萘酮phospho-TRADD(Ser274) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體規(guī)格:100 ul
2-溴-6-甲基吡啶TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體規(guī)格:100 ul
2-溴-6-甲基吡啶TNFR2/TRAF2/CD120b 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體規(guī)格:1 Kit
2-溴-6-甲基吡啶TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體規(guī)格:100 ul
轉(zhuǎn)基因品系玉米680染料法qPCR試劑盒細胞色素C蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗原C5H9N3
細胞色素C蛋白表達西方雜交分析試劑盒Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原C15H22O
細胞色素C蛋白免疫共沉淀分析試劑盒MAGE-1 黑色素瘤相關(guān)C30H48O3
細胞色素C活力比色法定量檢測試劑盒LFABP/FABP-2(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原C24H25ClFN5O3
細胞衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原C17H16O4
細胞衰老特異性晚期脂褐素高酸希爾(PAS)法品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE)原位染色試劑盒Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)C27H30O15
細胞衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha) 重組人腫瘤壞死因子C16H16O3
細胞衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒rh-VEGF(GST Tag)(Recombinant Vascuoar endothelial growth factor) 重組人血管內(nèi)皮細胞生長因子C8H8O2