細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

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2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

陳舊血紅細(xì)胞溶解 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

30%ACRYLAMIDE-BIS（29:1）溶 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升

細(xì)胞培養(yǎng)低密度脂蛋白膽固醇（LDL-Cholesterol）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

VEGF蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：5次

食物纖維素酶解法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

石蠟切片脂肪酸費(fèi)斯克勒（Fischler）間接染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：5次

石蠟切片神經(jīng)元胞漿尼斯（NISSL）染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

細(xì)胞B-RAF激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

麻風(fēng)桿菌（Leprosy Bacilli）染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

PrimaCell™大鼠膀胱成纖維細(xì)胞試劑盒說明書2-乙并咪唑分子式：146.19英文名稱：2- ethyl benzimidazole號(hào)：1848-84-6分子量： C9H10N2

4-氟-7-硝并-2-氧雜-1,3-二唑(NBD-F)英文名稱：4- -7- -1,3- and -2- two (NBD-F)分子式：183.1分子量： C6H2FN3O3號(hào)：29270-56-2

溴鉀分子式：119英文名稱：Potassium bromide號(hào)：2139626分子量： KBr

對(duì)硝氯分子式：157.56英文名稱：Para nitro benzene號(hào)：100-00-5分子量： C6H4ClNO2

1,1'-(對(duì)二甲)雙(4,4'-二吡)二溴物分子式：576.34英文名稱：1,1'- (two of benzene methyl (4,4'-) - pyridine bromide two) two號(hào)：106867-97-4分子量： C28H24Br2N4

6-氟-4-羥喹啉分子式：163.15英文名稱：6- -4- hydroxy group號(hào)：391-78-6分子量： C9H6FNO

4-脲唑分子式：177.16英文名稱：4- phenyl urea號(hào)：15988-11-1分子量： C8H7N3O2

丙分子式：668.39英文名稱：Propidium iodide號(hào)：25535-16-4分子量： C27H34I2N4

2,4-二氯-6,7-二甲氧喹唑啉分子式：259.09英文名稱：2,4- two, -6,7- two, a號(hào)：27631-29-4分子量： C10H8Cl2N2O2

1,3,5-三[(4-三氟甲磺酰氧)-3-(*硅)]分子式：967.12英文名稱：1,3,5- three [(4- three) -3- (three methyl silicone) phenyl] benzene號(hào)：847925-63-7分子量： C36H39F9O9S3Si3

羅丹明123英文名稱：Luo Danming 123分子式：380.82分子量： C21H17ClN2O3號(hào)：62669-70-9
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。