實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細胞 | GOY-01X0775 |
產品介紹:
名稱 大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞
2.組織來源:甲狀腺組織
3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞分離自甲狀腺組織;甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體,屬于內分泌器官。在哺乳動物身體中,它位于頸部甲狀軟骨下方,氣管兩旁。甲狀腺表面有結締組織被膜,表面結締組織深入到腺實質,將實質分為許多不明顯的小葉,小葉內有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞。甲狀腺控制使用能量的速度、制造蛋白質、調節(jié)機體對其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠制造甲狀腺素來調整這些反應,有T3和T4。這兩者調控代謝、生長速率還有調解其他的身體系統(tǒng)。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲狀腺也生產降鈣素,調節(jié)體內鈣的平衡。其中,甲狀腺濾泡上皮細胞(也稱為濾泡細胞或主要細胞)是在甲狀腺細胞是負責生產和分泌甲狀腺激素,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)。
5.方法簡介:
()實驗室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
()實驗室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞經TG(甲狀腺球蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產品貨號CM-R022
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細胞形態(tài)上皮細胞樣
傳代特性可傳1-2代
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 預熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得最佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
2 ug pCAMBIA2330 pCAMBIA2330 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Estriol
纖維二糖-(CC)瓊脂 Cellobiose-polymyxin E Agar 250g 0.156-10 ng/mL 人雙重特異性蛋白1(DUSP1)ELISA試劑盒
10g Indole 室溫保存 12.5-800 ng/mL 人高密度脂蛋白(HDL-C)ELISA試劑盒
50T 鏈球菌B族PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 78-5
大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞Aconitase 2/ACO2 鐵調節(jié)蛋白2抗體 0.2ml
2 ug pmCherry-LC3 pmCherry-LC3 低溫運輸,-20℃保存
ITC肉湯添加劑 ITC Broth Additive 1ml*5
LEPREL2 皮屑樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
100mL AMPSO Buffer,0.2M,pH8.0 AMPSO Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
馬鈴薯浸出粉 250g
5g 臺盼藍 Trypan Blue 室溫干燥保存
100mL TB Solution-I TB Solution-I 常溫保存
0.1mL 微量DNA助沉劑 DNADOWN -20℃保存
1瓶 UMNSAH/DF-1細胞株 UMNSAH/DF-1 低溫運輸和保存
48 T 堿性測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
KLK10 激肽釋放10抗體 規(guī)格: 0.1mlPKA/PKAcat/PKACB 蛋白激A抗體 規(guī)格: 0.1ml