細(xì)胞系跟細(xì)胞株的區(qū)別：
1、DLD-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞細(xì)胞株：原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系：細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
名稱 | DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | DLD 1; DLD1; CoCL3 |
種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
背景描述 | DLD-1細(xì)胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細(xì)胞與HCT-15細(xì)胞相似，說(shuō)明這兩者是來(lái)自同一個(gè)人的不同克隆。DLD-1細(xì)胞和HCT-15細(xì)胞的遺傳起源可通過(guò)DNA指紋鑒定證實(shí)，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)，p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p53抗原產(chǎn)生了一個(gè)C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽(yáng)性，癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測(cè)。DLD-1細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1細(xì)胞代數(shù)不明且污染了支原體，其后經(jīng)過(guò)12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理，處理之后每周用Hoechst染色和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法檢測(cè)。其后連續(xù)11個(gè)月不加抗生素培養(yǎng)，DLD-1細(xì)胞所有的檢測(cè)呈陰性。 |
年齡（性別） | 成年 |
組織來(lái)源 | 結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 |
細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類型 | 腸癌細(xì)胞 |
生物安全等級(jí) | 1 |
倍增時(shí)間 | ~24-48 hours |
致瘤性 | Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). |
抗原表達(dá)情況 | Blood Type O.The cells are weakly positive for keratins and vimentin.The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mut |
基因表達(dá)情況 | carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3. |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CCL-221 BCRC; 60132 DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540 |
注意事項(xiàng)：
1. 細(xì)胞較難消化，需要延長(zhǎng)消化時(shí)間，消化收縮變圓時(shí)，輕拍側(cè)邊方可終止消化
2. 推薦使用培養(yǎng)基，10%胎牛血清
3. 推薦傳代比例為1:3至1:4，建議37度消化3-4分鐘
收到細(xì)胞后如何操作:
1、首先，觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)及時(shí)與我司技術(shù)支持聯(lián)系。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進(jìn)行觀察。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
4、可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中，備用；細(xì)胞傳代時(shí)，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5、確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
6、建議客戶收到細(xì)胞后前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我們技術(shù)支持溝通交流。
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