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名稱 | AGS (人胃腺癌細胞) (STR鑒定正確) |
種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | Ham's F-12＋10% FBS＋1% P/S |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
背景描述 | AGS細胞源自一個未經(jīng)治療的切除腫瘤碎塊；據(jù)報道，AGS細胞的植板率為34%。 |
年齡（性別） | 女；54歲 |
組織來源 | 胃；胃癌 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 胃癌細胞 |
生物安全等級 | 2 |
倍增時間 | ~20-24 hours |
致瘤性 | Yes, in athymic BALB/c mice. |
保藏機構 | ATCC; CRL-1739 BCRC; 60102 BCRJ; 0311 |
細胞傳代：
1. 試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉染。
細胞轉染：
1. 轉染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。
甲狀腺激su受體α封閉多肽 | 白鮮皮染料法PCR鑒定試劑盒 |
蘇丹埃博拉病毒RT-PCR試劑盒 | 轉運體樣蛋白4ELISA試劑盒 |
人Spondin-2 試劑盒ELISA | 成纖維細胞生長因子受體4ELISA試劑盒 |
人電壓門控鉀通道(VGKC)ELISA試劑盒 | 肺炎衣原體抗體IgAELISA試劑盒 |
人血管抑su/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)試劑盒elisa | 超敏前列腺特異性抗原ELISA試劑盒 |
人高糖基化人絨毛膜促性腺激su(hCG)ELISA檢測試劑盒 | 大腸癌專一抗原3ELISA試劑盒 |
微管蛋白封閉多肽 | 豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒 |
拉鏈結構域蛋白ROGDI封閉多肽 | 病毒HN（AIV-HN）核suan檢測試劑盒 |
CD361封閉多肽 | 玉米NOS/SS PCR檢測試劑盒 |
腫瘤轉移抑制蛋白1封閉多肽 | 傳染性法氏囊病病毒PCR檢測試劑盒 |
CD59封閉多肽 | 驢源性成分(Don)核suan檢測試劑盒 |
整合suα2（CD49b）封閉多肽 | AGS人胃腺癌細胞禽腺病毒PCR試劑盒 |
囊包蛋白/內(nèi)披蛋白封閉多肽 | 禽腎炎病毒1型RT-PCR試劑盒 |
垂體瘤轉化蛋白2封閉多肽 | 駱駝源性成分PCR試劑盒 |
生物su標記重組人TNF家族B細胞激活因子(Trimer)蛋白 | 羅西奧病毒PCR檢測試劑盒 |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
