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產品介紹:
Tth Endonuclease IV
描述:
核酸內切酶 IV 來源于 E.coli,參與 DNA 損傷修復。該酶可識別雙鏈 DNA 分子上的脫嘌呤/脫嘧啶(AP)位點,并切割 AP 位點 5′ 端的第一個磷酸二酯鍵,產生 3′羥基和 5′ 脫氧核糖磷酸末端(deoxyribose phosphate,dRP)。另外該酶還具有 3′二酯酶活性,能從 DNA 的 3′末端釋放磷酸甘油醛、完整的脫氧核糖 5′-磷酸和磷酸。
該酶的最佳底物為 AP 雙鏈 DNA,但對 AP 單鏈 DNA 也有一定活性。
儲存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反復凍融。
活性定義:一單位指在 10μl 反應體系中,37°C 反應15min,切割 1 pmol 含一個 AP 位點的 34mer 寡核苷酸雙鏈,所需要的酶量。
1×Endo IV Buffer:20mM Tris-HCl,pH8.5; 50mM KCl;0.1% Tween20;0.02% BSA, 5mM Mg2+。
熱失活:85°C,20min。
酶儲存液:50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1
mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。
使用方法
含 AP 位點的 DNA 2-20pmol
10X Endon IV Buffer 2 μl
Endonuclease IV (20 U/μl) 1 μl
ddH2O Up to 20 μl
37°C 反應 15-30min。
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