公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
5min極速病毒RNA提取試劑盒本試劑盒采用裂解液,可快速可靠的從病毒液樣本中純化出高純度的總 RNA。該試劑盒是目前國際上操作步驟最少、用時(shí)最短的病毒 RNA 提取試劑盒(僅需要 5 分鐘)。應(yīng)用本試劑盒提取的 RNA 可直接用于反轉(zhuǎn)錄、基因克隆、定量 PCR 檢測等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
(1) 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇,無需單獨(dú)添加。
(2) RNA LB1 和 RNA BB2 均具有腐蝕性,注意防護(hù)。
操作方法
(1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中處理)
液體樣本:血清、血漿、唾液、痰液、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)病毒上清液等液體樣本直接吸取 150 μl 到 1.5ml EP 管中,并加入 120 μl RNALB1,漩渦混合均勻 10 秒。打開 1.5ml EP 管蓋,并加入 500 μl RNABB2 中,漩渦混合均勻 10 秒。倒入吸附柱中,13000 rpm 離心 30秒,倒掉過柱后的廢液,進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
抗凝全血:直接吸取 150 μl 到 1.5 ml EP 管中,并加入 120 μl RNA
LB1,漩渦混合均勻 10 秒。打開 1.5 ml EP 管蓋,并加入 500 μl RNA
BB2 中,漩渦混合均勻 10 秒。13000 rpm 離心 30 秒后,將上清液倒入吸附柱中,13000 rpm 離心 30 秒,倒掉過柱后的廢液,進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
固體樣本:組織、糞便等樣本。取 10~100 mg 固體材料樣本,加入到 300 μl RNA LB1 中(1.5ml EP 管),并加入幾粒鋼珠(一般3~4 粒),置于組織研磨儀中,研磨 1 分鐘。研磨完畢后,打開管
蓋,向勻漿液中加入 750 μl RNA BB2,并 13000 rpm 離心 1 分鐘。
打開管蓋,用 1 ml 吸頭吸取 750 μl 上清液到吸附柱中。13000 rpm離心 30 秒,倒掉過柱廢液,進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
(2) 洗滌和洗脫
上述裂解/上柱操作完畢后,向吸附柱中加入 500 μl WashingBuffer,13000 rpm 離心 15 秒,并倒掉過柱廢液。重復(fù)此洗滌步驟一次。 將吸附柱重新放回離心機(jī),13000 rpm 空離心 1min,將殘留的乙醇甩干。 將吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50 μl Nuclease Free H2O,室溫放置1 min,13,000rpm離心 1min,洗脫液即為提取的病毒RNA,冷凍保存。
特別說明:
(1)RNA LB1 和 RNA BB2 含有高鹽,在樣本加入到此溶液后,病毒會迅速滅活。同時(shí)此溶液對皮膚有腐蝕性,務(wù)必做好防護(hù),如接觸到皮膚,用大量清水沖洗。
(2)樣本處理過程中的吸頭等材料可能含病毒分子,實(shí)驗(yàn)完畢后務(wù)必妥善處理,不能隨意丟棄。
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