免疫親和柱可用于食品/飼料中*12的萃取液的凈化處理，性能穩(wěn)定，操作簡單快速。柱內(nèi)含有維生素
B12抗體，以共價鍵形式粘附于凝膠顆粒上。
PriboFast*12免疫親和柱
【產(chǎn)品描述】
免疫親和柱可用于食品/飼料中*12的萃取液的凈化處理，性能穩(wěn)定，操作簡單快速。柱內(nèi)含有維生素
B12抗體，以共價鍵形式粘附于凝膠顆粒上。
【儀器試劑】
儀 器 | 試 劑 |
天平、均質(zhì)器、注射器、微量移液器、濾紙、鐵夾子、漏斗、燒杯 | 甲醇100％、鹽酸1N、 0.01M PBS、濃鹽酸（36％）、氫氧化鈉(1N)、雙蒸水、1N Na2HPO4(液相用) |
【樣品準(zhǔn)備】
所有水狀溶液都可作為樣品檢測，但要確保其pH為7±0.5，否則，先用1N鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。如果樣品不清澈，需先離心，以免阻塞免疫親和柱。
固體樣品
1）一般的水溶性樣品可以溶解后直接分析。將樣品溶解于雙蒸水后，調(diào)節(jié)pH為7±0.5，注意要預(yù)先除去混濁物。
2）可以選擇離心、過濾、Carrez試劑沉淀等方法凈化樣品。取樣品溶液5ml分別加入250ul Carrez I 試劑和250ulCarrez II試劑，然后離心除去沉淀物。
3）難溶于冷水的樣品，可通過溫育加熱使其溶解。
4）對于不溶性如谷物類樣品，要先將樣品進行粉碎成中細(xì)粒粉末，稱取2g樣品溶于10ml雙蒸水中，振蕩器上震蕩30分鐘（120次/分）。也可用磁轉(zhuǎn)子混勻。然后將溶液過濾或在3000轉(zhuǎn)離心5分鐘，調(diào)節(jié)pH為7±0.5，然后用于過柱。
液體樣品
1）對于高脂性樣品奶油類，為分離脂肪，需先低溫離心15分鐘（2-8℃，3000轉(zhuǎn)）。
2）除去脂肪層后直接將樣品過柱。如果樣品是高度粘稠，還需用0.01M的PBS溶液進行稀釋（按1:2－1:10的倍數(shù)）。
3) 富含蛋白樣品需預(yù)先除去蛋白。每5ml樣品中加入20ul濃鹽酸(36％)，在60℃溫育45分鐘。然后離心10分鐘(3000轉(zhuǎn))，用1N的鹽酸調(diào)節(jié)pH到7±0.5
10分鐘(3000轉(zhuǎn))，用1N的鹽酸調(diào)節(jié)pH到7±0.5
【操作步驟】
1）每個樣品需用一個新柱子；
2）將柱子和樣品溶液處于室溫；
3）取下免疫親和柱的塞子，割下塞子上突出的部分，將這個不再密封的塞子放回柱子上；
4）將柱子與注射器連接，用鐵夾子整個固定起來。柱子下面放一個燒杯。
5）將準(zhǔn)備好的樣品溶液加入注射器里，并取下柱底部的蓋子。
6）樣品溶液在重力下過柱；
7過完柱后用10ml蒸餾水到注射器清洗，過柱。水流過柱子后，用推桿讓1-2倍的空氣再經(jīng)過柱子。
8）將干凈的試管放在柱子底部。加1ml純甲醇到（干的）注射器里，重力下通過柱子。如果甲醇過柱的速度慢，可以在過柱開始時用壓力泵（盡量不要全程使用壓力泵）。提取的時間不要少于1分鐘。
9）讓部分空氣通過柱子，收集剩余的甲醇洗提液。
10）取50μl加到HPLC進樣。
