淀粉檢測(cè)試劑盒
【原理】
淀粉+(n-1)H2O—AGS→ n D-葡萄糖
D-葡萄糖+ ATP—已糖激酶→G-6-P+ADP
G-6-P+NADP+—G-6 -PDH→6-PG+NADH+H+
【測(cè)定條件及步驟】
樣品溶液:樣品中淀粉濃度在0.05-0.8 g/l
準(zhǔn) 確 率:在給定條件下,質(zhì)控溶液變異在5 %
Hydrolysis 溶液:將10ml R1與50ul R2混合(或30ml/150ul; 20ml/100ul)。2~8℃下可保存4周。
| 試劑空白 | 樣品空白 | 樣品 |
Hydrolysis 溶液 | 1000 ul | - | 1000 ul |
蒸餾水 | 500ul | 1500 ul | - |
樣 品 | - | - | 500 ul |
混合均勻并在60℃溫育15分鐘 |
繼續(xù)進(jìn)行葡萄糖檢測(cè)(葡萄糖試劑盒):
波長(zhǎng):340 nm 比色杯:1 ㎝
溫度:20~37 ℃ 測(cè)定時(shí):用水或空氣校準(zhǔn);
| 試劑 空白 | 樣品 空白 | 樣品 |
R1 | 1000 | 1000 | 1000 |
蒸餾水 | 1000 | 1000 | 1000 |
樣品 | 300 | 300 | 300 |
混合均勻并讀取吸光度值 | A1 | A1 | A1 |
R2 | 20 | 20 | 20 |
混合反應(yīng)20分后讀取吸光度值 | A2 | A2 | A2 |
【計(jì)算】
ΔA淀粉 = (A2―A1)樣品―(A2―A1)樣品空白―(A2―A1)試劑空白
C = (V×MW×ΔA) / (ε×d×v×1000)
C ==0.60425×ΔA [g /l,淀粉濃度]
計(jì)算時(shí)注意考慮稀釋倍數(shù)