細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞;Hep3b培養(yǎng)條件
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 Hep-3b細(xì)胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細(xì)胞產(chǎn)生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗*(alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體(C3)、C3活性載體,纖維原等,具有廣泛的研究?jī)r(jià)值。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Bala傳代方法 1:4~1:6傳代,每周換液2次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:8;D13S317:12,14;D16S539:10;D18S51:20;D19S433:12.2,14;D21S11:30,31;D2S1338:21,25;D3S1358:15,OL;D5S818:13;D7S820:8,10;D8S1179:12;FGA:18;TH01:6,7;TPOX:9;vWA:17;
同工酶
染色體 60~82
使用權(quán)限 A類
人肝癌細(xì)胞;Hep3b培養(yǎng)條件冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人肝癌細(xì)胞;Hep3b培養(yǎng)條件操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購(gòu)買人肝癌細(xì)胞;Hep3b培養(yǎng)條件注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
蛋白激酶Cγ(PKCγ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Gamma (PKCg)
蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)
蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
蛋白激酶R(PKR)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase R (PKR)
蛋白酶激活受體2(PAR2)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 2 (PAR2)
蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
低密度脂蛋白受體(LDLR)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor (LDLR)
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)重組蛋白 Recombinant Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
抵抗素(RETN)重組蛋白 Recombinant Resistin (RETN)
抵抗素樣蛋白β(RETNLβ)重組蛋白 Recombinant Resistin Like Beta (RETNLb)
淀粉樣前體蛋白(APP)重組蛋白 Recombinant Amyloid Precursor Protein (APP)
talatisamine 塔拉薩敏;塔拉烏頭胺 20501-56-8 Lucidenic acid C 赤芝酸C 95311-96-9
Nodakenin 紫花前胡苷 495-31-8 408.4 C20H24O918797-79-0 紫蓳靈; 紫堇醇靈堿 CORYNOLINE 367.39 C21H21NO5
牛七 Twotooth Achyranthes Root Isoquercitrin 異槲皮素 21637-25-2 C21H20O12 ≥98%麝香酮 3-Methylcyclopentadecanone 541-91-3 238.4088 C16H30O
廣東紫珠Callicarpa kwangtungensis Poliumoside 金石蠶苷 94079-81-9 C35H46O19 ≥98%aloe-emodine 蘆薈大黃素 481-72-1 270.24 C15H10O5
紫金牛科的百兩金 Crispaeaf Ardisia Root Ardisiacrispin A 百兩金素A 23643-61-0 C52H84O22 ≥98%番瀉苷元A [9,9'-Bianthracene]-2,2'-dicarboxylicacid, 9,9',10,10'-tetrahydro-4,4',5,5'-tetrahydroxy-10,10'-dioxo-,(9R,9'R)-rel-(+)- 641-12-3 538.45792 C30H18O10
梭砂貝母酮堿;新貝甲素 6426-43-3 蒲公英甾醇乙酸酯 taraxasterol acetate 468.75408 C32H52O2
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Tetrachyrin none 73483-88-2 C20H28O2 ≥95%D(-)-Salicin 水楊苷 138-52-3 286.28 C13H18O7
山龍眼科植物蘿卜樹 Helicid Hilgirica Beed的果實(shí) Helicide 豆腐果苷 80154-34-3 C13H16O7 ≥98%69363-14-0 五味子酚 Schisanhenol 402.47 C23H30O6
漿果楝Cipadessa baccifera Aglinin A none 246868-97-3 C30H50O5 ≥97.5%夏佛塔苷 APIGENIN-6-GLUCOSIDE-8-ARABINOSIDE 51938-32-0 564.49212 C26H28O14
人肝癌細(xì)胞;Hep3b培養(yǎng)條件云南紅豆杉Taxus yunnanensis 2-Deacetoxytaxinine B 2-去乙酰氧基紫杉素 B 191547-12-3 C35H42O9 ≥95%大黃梔子Gardenia sootepensis Secaubryenol none 925932-08-7 C30H48O3 ≥97%
mangiferin from mangifera indica leaves 芒果苷 4773-96-0 422.33962 C19H18O11177931-17-8 三白草酮 SAUCHINONE 356.3692 C20H20O6
牽牛子Semen Pharbitidis Ethyl caffeate *乙酯 102-37-4 C11H12O4 ≥98%Tripdiolide *乙素 38647-10-8 376.4 C20H24O7
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