細(xì)胞名稱 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE(2)運(yùn)輸
形態(tài)特性 神經(jīng)母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1972年11月從一們多次*及放療的擴(kuò)散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株。 該細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 有報(bào)道稱SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過1x106細(xì)胞/平方厘米。細(xì)胞形態(tài)多樣,有的有長(zhǎng)突觸,有的呈上皮細(xì)胞樣。 細(xì)胞會(huì)聚集,形成團(tuán)塊并浮起。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earl傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(36+5)
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:14,16;D19S433:12,13;D21S11:30,31,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE(2)運(yùn)輸冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE(2)運(yùn)輸操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE(2)運(yùn)輸注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
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Acc65I (Asp718I) 5000 unitsFastDigest® EcoO109I 200 react
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RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 100 rxnsFastDigest® AcuI (Eco57I) 20 react
Cordia ecalyculata Resorcinol * 108-46-3 C6H6O2 ≥95%桂皮 Cassia Twig p-Hydroxy-cinnamic acid 對(duì)羥基肉桂酸 7400-08-0 C9H8O3 ≥98%
靈芝酸A GANODERIC ACID A 81907-62-2 514.65028 C30H42O7半枝蓮Scularia barbata Scutebata G none 1207181-63-2 C40H41NO9 ≥95%
Luculia pincia 2'-Hydroxy-5'-methoxyacetophenone 2'-羥基-5'-甲氧基苯乙酮 705-15-7 C9H10O3 ≥95%砂仁Fructus Amomi Bornyl acetate 乙酸龍腦酯 20347-65-3 C12H20O2 ≥98%
秦艽 Gentiana macrophylla Pall. Gentiannine 秦艽甲素 439-89-4 C10H9NO2 ≥98%89590-98-7 羅漢果苷VI Mogroside VI 1449.57508 C66H112O34
Pseudoginsenoside F11 擬人參皂苷F11 69884-00-0 786.9861 C41H70O1421399 Caffeine
白果內(nèi)酯 Bilobalide 33570-04-6 326.3 C15H18O8珠子參Panacis Majoris Rhizoma Chikusetsu saponin Ⅳa 竹節(jié)參皂苷IVa 51415-02-2 C42H66O14 ≥98%
王不留行黃酮苷 Vaccarin 53452-16-7 726.63272 C32H38O19金粟蘭Chloranthus spicatus Isofuranodiene 異莪術(shù)呋喃二烯 57566-47-9 C15H20O ≥97%
車桑子Dodonaea viscosa Dodonolide (6R,7S,8E,10Z)-7-[2-(3-呋喃基)乙基]-4,5,6,7-四氫-6,7-二甲基環(huán)癸并[c]呋喃-1(3H)-酮 349534-73-2 C20H24O3 ≥95%刺桐Erythrina arborescens Erythristemine (3beta,11alpha)-1,2,6,7-四去氫-3,11,15,16-四甲氧基刺桐烷 28619-41-2
滇五味子Schisandra henryi var. yunnanensis Gomisin M2 五味子脂素 M2 82425-45-4 C22H26O6 ≥97%吳茱萸Evodia rutaecarpa 1-Hydroxyrutaecarpine 1-羥基吳茱萸次堿 53600-24-1 C18H13N3O2 ≥98%
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE(2)運(yùn)輸20(S)-Ginsenoside Ck 人參皂苷CK 39262-14-1 622.87268 C36H62O8柴胡Bupleurum chinense DC. Saikosaponin B1 柴胡皂苷B1 58558-08-0 C42H68O13 ≥98%
臭椿Ailanthus altissima β-Carboline-1-propanoic acid Beta-咔啉-1-丙酸 89915-39-9 C14H12N2O2 ≥98.5%垂盆草Sedum sarmentosum (-)-N-Methylsedridine (-)-N-甲基石榴堿 41447-15-8 C9H19NO ≥95%
Patchouli alcohol 百秋李醇 5986-55-0 222.37 C15H26O20362-31-6 牛蒡子苷 arctiin 534.55 C27H34O11
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