細(xì)胞名稱 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣;圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 MOLT-4與MOLT-3來源于一名19歲的男性急性淋巴細(xì)胞性白血病的復(fù)發(fā)患者,該患者前期接受過多種藥物聯(lián)合化療。MOLT-4細(xì)胞系為T淋巴細(xì)胞起源,p53基因的第248位密碼子有一個G→A突變,不表達(dá)p53,不表達(dá)免疫球蛋白或EB病毒;可產(chǎn)生高水平的末端脫氧核糖轉(zhuǎn)移酶;表達(dá)CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在4×105/ml~2×106/ml;根據(jù)細(xì)胞濃度每2~3天補液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12,13;D13S317:12,13;D16S539:11,14;D18S51:13,17;D19S433:14,15;D21S11:28,29,30,31;D2S1338:23,24;D3S1358:14,16;D5S818:12;D7S820:8,10,11;D8S1179:9,14;FGA:22,23,25;TH01:6,8;TPOX:8;vWA:17,18
同工酶
染色體 84~89
使用權(quán)限 A類
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
小鼠P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒 Mouse Substance P,SP ELISA Kit
豚鼠白介素13(IL-13)免疫試劑盒 Guinea pig interleukin 13,IL-13 ELISA Kit
豚鼠白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒 Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA KIT
豚鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒 Guinea pig interleukin 10,IL-10 ELISA Kit
豚鼠白介素1(IL-1)免疫試劑盒 Guinea Pig Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit
豚鼠白蛋白免疫試劑盒 Guinea Pig Albumin ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
豚鼠α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒 Guinea Pig Interferon α,IFN-α ELISA Kit
豚鼠P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒 Guinea pig Substance P,SP ELISA Kit
豚鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)免疫試劑盒 Guinea pig KL-6 (Krebs yon den Lundgen-6) ELISA Kit
豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)免疫試劑盒 Guinea pig 25-hydroxy vitamin D3,25 HVD3 ELISA kit
白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit
白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: Diphtheria Ab ELISA Kit
白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 ,英文名: TR ELISA Kit
八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 ,英文名: OTF2B ELISA Kit
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4操作步驟八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 ,英文名: OTF2A ELISA Kit
艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA試劑盒 ,英文名: IDS ELISA Kit
癌癥促凝素(CP)ELISA試劑盒 ,英文名: CP ELISA Kit
癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒 ,英文名: CEF ELISA Kit