水飽和正丁醇10mL售后服務(wù)的詳細(xì)介紹:
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
質(zhì)量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個(gè)工作日
水飽和正丁醇10mL售后服務(wù)服務(wù)流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質(zhì)
客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細(xì)胞、細(xì)菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個(gè)月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細(xì)的背景資料:來源、特點(diǎn)、類型等
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實(shí)驗(yàn)條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實(shí)驗(yàn)人員,保證您的實(shí)驗(yàn)得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
that GAD may be an important marker in the early stages of the disease. Also, autoantibodies to GAD65 and GAD67 are detected in animal models of IDDM, including the non-obese diabetes (NOD) mouse. In the NOD mouse, T cell reactivity is initially restricted to the C terminal regions of GAD65, but later spreads to other parts of GAD65. Stiff-man syndrome (SMS), a rare disorder of the CNS, is characterized by progressive rigidity of the body musculature with painful spasms, due to impairment of the GABAergic neurotransmission.
High-titer autoantibodies directed against GAD 65 and GABAergic neurons (nerve terminals) have been detected in the serum and cerebrospinal fluid (CSF) in 60% of patients with the syndrome. Strikingly, many of the SMS patients also developed late-onset IDDM.
Function : Catalyzes the production of GABA.
Subunit : Homodimer.
Subcellular Location : Cytoplasm, cytosol. Cytoplasmic vesicle. Cell junction, synapse, presynaptic cell membrane; Lipid-anchor. Golgi apparatus membrane; Peripheral membrane protein; Cytoplasmic side. Note=Associated to cytoplasmic vesicles. In neurons, cytosolic leaflet of Golgi phospho-IRS1 磷酸化胰島素受體底物-1試劑盒
phospho-IRS-2 磷酸化胰島素受體底物2試劑盒
phospho-IKK beta 磷酸化KB抑制蛋白激酶β試劑盒
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phospho-ILK-1 磷酸化整合素連接激酶1試劑盒
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phospho-IRS1 磷酸化胰島素受體底物1試劑盒
phospho-ICAM1 磷酸化細(xì)胞間粘附分子1試劑盒
phospho-ITGB3 磷酸化整合素β3試劑盒
phospho-IGF1R 磷酸化胰島素樣生長因子1受體試劑盒
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phospho-ITGB3 磷酸化整合素β3試劑盒