我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠心肌成纖維細胞試劑盒說明 | T25m2 | CS-963403 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)1020399-49-8 CARM1-IN-1 10mg Sargassum海藻染料法PCR鑒定試劑盒
1020399-49-8 CARM1-IN-1 50mg Endoconcha sepiae海螵蛸染料法PCR鑒定試劑盒
1020412-43-4 Gardiquimod 5mg Endoconcha sepiae海螵蛸染料法PCR鑒定試劑盒
1020412-43-4 Gardiquimod 10mg Spora lygodii海金沙染料法PCR鑒定試劑盒
1020412-43-4 Gardiquimod 25mg Spora lygodii海金沙染料法PCR鑒定試劑盒
(tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil 中文名: 分子式:C28H37N5O10S2 度:98.0% 豚鼠內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒 豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒、豚鼠內(nèi)皮型合成酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2 度:98.0% 豚鼠內(nèi)皮素1elisa試劑盒 豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒、豚鼠內(nèi)皮素1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Cefcapene pivoxil 中文名:鹽酸頭孢卡品酯 分子式:C23H32ClN5O9S2 度:98.0% 小鼠17羥孕elisa試劑盒 小鼠17羥孕試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠17羥孕試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠17羥孕試劑盒、小鼠17羥孕eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Baclofen 中文名:巴氯芬 分子式:C10H12ClNO2 度:98.0% 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone 中文名: 分子式:C12H15ClO3 度:98.0% 豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠心肌成纖維細胞試劑盒說明1043865-37-7 CAY10733 10mg Canine Influenza Virus H3N2(CIV-H3N2)犬流感病毒H3N2型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1043865-37-7 CAY10733 1mg Canine Influenza Virus H1N1(CIV-H1N1)犬流感病毒H1N1型PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1043865-37-7 CAY10733 50mg Canine Influenza Virus H3N2(CIV-H3N2)犬流感病毒H3N2型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1043865-37-7 CAY10733 5mg Canine Influenza Virus H1N1(CIV-H1N1)犬流感病毒H1N1型染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1043881-55-5 L803-mts 1mg Canine Influenza Virus H3N2(CIV-H3N2)犬流感病毒H3N2型PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。