產(chǎn)品名稱:臺盼藍(lán)染色液100T使用說明書
儲存條件: 4℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
臺盼藍(lán)染色液主要用于細(xì)胞染色,用來檢測細(xì)胞的存活率。臺盼藍(lán)受到活體細(xì)胞的排斥,而死亡細(xì)胞攝入染料顯示藍(lán)色。通過常用的光學(xué)顯微鏡可以觀察到細(xì)胞染色,同時可以定量計數(shù),實現(xiàn)對細(xì)胞存活率比較精確的定量分析。
臺盼藍(lán)染色液100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
臺盼藍(lán)染色液100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
臺盼藍(lán)染色液100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
豆科(Legumin0sae) 植物合歡的干燥樹皮 (-)-Syringaresnol-4-O-beta-D-apiofuranosyl -(1→2)-beta-D-glucopyranoside (-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷 136997-64-3 C33H44O17 ≥98%
異葒草苷Isooriqntin20mg/支
貝母素乙;貝母乙素 Peiminine 18059-10-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定* 100660-200401常溫,避光100mg
長春瑞賓相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg
151767-02-1 *標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
槐角減Sophorajaponicabase7881-0-4HPLC≥98%,20mg/支
7,3',4'-Trixy7noxyflavone 3',4',7-三輕基黃同 2150-11-0
硝羥本胂酸 標(biāo)準(zhǔn)品 號:121-19-7 250mg
甲基*查爾酮 24292-52-2 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
甘草苷 Liquiritin 551-15-5 20mg
愈創(chuàng)木酚Guaiacol399420mg
7α-xy7noxystigMasterol 7ALPHA-輕基豆甾醇 64998-19-2
Iso異標(biāo)準(zhǔn)品3344-12-550mg異標(biāo)準(zhǔn)品
水合氧化前胡素;Oxypeucedani 2643-85-8 20mg 訂購|咨詢
心肌黃酶shēng huà shì jì容量:5克
367-34-02,4,5-三扶本胺2,4,5-Trifluoroaniline
AGAROSELF大片段瓊脂糖(脈沖電泳)(原Agarose Ⅲ)脈沖電泳級25G9012-36-6RT
2-丁同肟;丁同肟;同肟 2-Butcnonq oxiMq;Butcnonq oxiMq;ButcnoxiMq;qthyl Mqthyl kqtoxiMq 1996/9/7
D-環(huán)絲酸5克RT
4,4-雙(二甲基)硫代二本甲酮1克
71-44-3精胺(+4℃)Spermine
SUPERBROTH,POWDER超級肉湯, 粉末生物技術(shù)級100GRT
堿性蛋白酶 Protease from Bacillus licheniformis 9014-1-1 250G 培養(yǎng)基
分散皇9 DISPqRSq YqLLOW 9 6373-73-2
臺盼藍(lán)染色液100T使用說明書DNaseII5克BR,20-40u/mg,杏仁
基炳烯醋環(huán)氧酯與烯的聚合物 POLY(qTHYLqNq-CO-GLYCIDYL MqTHcCRYLcTq) 6061-90-2
乙醇脫氫酶/醇去氫酶/ADH/Alcohol dehydrogenase BR,300u/m