BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書儲存條件:BCA 試劑室溫保存。蛋白標準-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。BCA法快速靈敏、穩(wěn)定可靠,對不同種類蛋白質(zhì)檢測的變異系數(shù)非常。
BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響。在組織細胞蛋白提取過程中,常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween 不影響檢測結(jié)果
BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
白曼陀羅 Datura metm L Scopolamine butylbromide *堿 149-64-4 C21H30BrNO4 ≥98%
刺五加葉中InthqlqcvqsofcccnthopcncxsqnticosusHPLC≥98%,20mg/支
橙黃決明素;橙鈍葉決明素 Aurantio-obtusin 67979-25-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材土鱉蟲(地鱉)121533-200501TLC法鑒別
VASICINE HCL 鴨嘴花堿鹽酸鹽 純度:>95
17598-65-1 *丙標準品 100mg
抗*血清Serumantimannanpeptide
Farrerol 杜鵑素 24211-30-1
Itraconazole*標準品84625-61-6 100mg
紫萁酮 HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢
88546-55-8 *雜質(zhì)D對照品標準品(-20℃) 10mg
柚Citrus maxima 6,7-二輕薄荷素 264234-05-1 C21H24O6 ≥95% 薄荷醇1 966-100
阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)A標準品124752-25-620mg
頭孢吡肟相關(guān)物質(zhì)D標準品ea
熊果酸 77-52-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
小鼠磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)ELISA試劑盒 ,英文名: PDPK1 ELISA Kit
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大鼠煙堿型乙酰*受體(N-AChR)免疫試劑盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit
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鈣泵SERCA蛋白表達檢測試劑盒20次
ELISAKitLPS人脂多糖/內(nèi)毒素規(guī)格:48T/96T
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Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動素(MTL)ELISA試劑盒
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCorticosterone,CORISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CORT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
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BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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