Bradford 蛋白定量試劑盒250T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Bradford 蛋白定量試劑盒250T免費(fèi)代測儲存條件:染色液2-8℃保存。蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
Bradford法(考馬斯亮藍(lán)法),是目前靈敏度高的蛋白質(zhì)測定法之一。當(dāng)Bradford染色液(考馬斯亮藍(lán)G250)和蛋白在酸性條件下結(jié)合時,溶液顏色由棕黑色轉(zhuǎn)為藍(lán)色,大吸光值波長由456nm轉(zhuǎn)至595nm,吸光值與蛋白質(zhì)的含量在一定濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,通過測定吸光值大小并對照標(biāo)準(zhǔn)蛋白的吸光值,推算出蛋白濃度,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速,穩(wěn)定和高靈敏度。Bradford染色液為2倍濃縮母液,便于儲存。
Bradford 蛋白定量試劑盒250T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
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白曼陀羅 Datura metm L Scopolamine xy7nobromide 東莨菪堿輕臭鹽 114-49-8 C17H21BrNO4 ≥98%
竹節(jié)香附速ARcddqcninc20mg/支
*;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二輕黃同甙;*;二輕黃同苷 Hesperidin 520-26-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100700-200401常溫,避光100mg
eetone1.5ml×3ampules
176447-94-2 多非利特相關(guān)化合物A標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 25mg
三尖杉Cephalotaxus fortunei 2,7-二輕高刺桐春 51095-85-3 C20H27NO3 ≥95% 睪同:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000
Astemizole阿司咪唑標(biāo)準(zhǔn)品68844-77-9200mg
甲錄噻嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品100mg甲錄噻嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
羅漢果皂苷V 88901-36-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
油樟Cinnamomum longepaniculatum (Gamble) *精 470-82-6 C10H18O ≥98% 乙二醇水楊酸酯(H1429400
滅草醌標(biāo)準(zhǔn)品 阿納寧標(biāo)準(zhǔn)品 拉草標(biāo)準(zhǔn)品
Cyclothiazide (AS)莰烯錄噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品2259-96-3200mg莰烯錄噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品
文多靈 2182-14-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
小鼠磷酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒 ,英文名: PTEN ELISA Kit
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