Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
BRL-3A(大鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0053Calu-1(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
GALNT2 Others Human 人 GALNT2 / GalNAc-T2 人細胞裂解液 (陽性對照)
ZR-75-30細胞，人癌細胞系 人T淋巴細胞(白血病CD8+),Molt-4細胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
CPE Others Human 人 CPE 人細胞裂解液 (陽性對照)
人成纖維細胞總RNAHMF tRNA
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
狗腎細胞隆突型;MDCK superdome
PANC-1細胞，人胰腺癌細胞 人橫紋癌細胞,A673細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;MEF
HO-8910(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(*) 100ml
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照)
破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
LTEP-P細胞，人小細胞肺癌細胞 小鼠前成骨細胞,MC-3T3細胞 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2
TF-1(人血液白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
NHDF-c 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自少年者 x500,000cells 氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
鵝P450*側鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓素A2(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit
人抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 ，英文名： EMA IgA ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanGamma-aminobutyricacid,GABAELISA試劑盒人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-presynapticmembraneantibody,PsmAbELISA試劑盒人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物細胞染色體分離試劑盒20次
HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit人特異生長因子/相關因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒100T免費代測小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
