天青石藍(lán)B染色液50ml使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
天青石藍(lán)B染色液50ml使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
天青石藍(lán)B染色液50ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PG49細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

輸尿管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HDLEC-c adult 人類皮膚淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(HDLEC)來(lái)自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 頜下腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

T-103AI型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

TU 686細(xì)胞，人喉癌細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,ECV-304細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫*還原酶缺陷型;CHO/dhFr-

C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞HN-h

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3

SPC-A1細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞 CM-M034小鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Sf-9(昆蟲(chóng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEK.f-c 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年，單一來(lái)源 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)ELISA試劑盒 ，英文名： AT1R ELISA Kit

人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAdenovirusAntigen,ADV-AgELISAKit 96T/48T

大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉(zhuǎn)移酶,線粒體(PGS1)免疫試劑盒 Rat PGS1 ELISA kit

CLIAKitforsE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素規(guī)格：48T/96T

*核酸-蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒10次

ELISAKitCSF人集落刺激因子規(guī)格：48T/96T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒

HumanAnti-OvaryAntibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancholecystokinin,CCKELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫外可見(jiàn)光分析20樣本

HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
天青石藍(lán)B染色液50ml使用說(shuō)明書(shū)人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝