我司細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
IGFBP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IFI30 Others Human 人 IFI30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
JeKo-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 JeKo-1 human mantle cell lymphoma cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS
胎盤絨毛膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
H22(小鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠顆粒細(xì)胞MGC
CL-0396NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CNTFR Others Human 人 CNTFR / CNTFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞RNAHCPEpiC miRNA5 μg
6T-CEM細(xì)胞,T細(xì)胞白血病 人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞,801-D細(xì)胞 細(xì)胞
貓腎細(xì)胞;CRFK
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-h)(5×105)
人真皮淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDLEC tRNA
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0
小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus
GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)調(diào)節(jié)素1亞型HRGβ1(NRG1)免疫試劑盒 Human neuregulin 1 isoform HRG-beta 1,NRG1 ELISA kit
MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PASE-1蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次
HumanMethylaseELISA試劑盒人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPlaetFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人硬骨素(SOST)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tissue factor (TF) ELISA Kit 大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒
Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1ELISAKit 人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterleukin1,IL-1ELISA試劑盒人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織巨噬細(xì)胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanisletcellantibody,ICAELISAKit人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T售后服務(wù)大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠toll樣受體相關(guān)分子(TRAM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝