Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg操作步驟詳細說明書：
Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg操作步驟產品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鎢酸鉀500克
SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原裝
氫氧化鋇shēng huà shì jì容量：RT5克
隊肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8
葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量：2000u
酸洗石棉25克
573-56-82,6-二硝基酚;2,6-二硝基本酚;β-二硝基酚2,6-pxenol;β-pxenol
癸二酸二甲酯25克RT
2-噻吩乙酰 2-Thiopheneacetyl chloride 39098-97-0 5G 通用試劑
Beef Extract Powder 68990-09-0 500G 通用試劑
AMMONIUMPERSULFATE(APS)過 (APS)蛋白組學級100G7727-54-0RT
11061-68-0*Insulin, huMan
5-acetyl-4-amino-2-(metxylthio)thiopxene-3-carbonitnile 116171-01-8
全甲基環(huán)己烷 Perfluoromethylcyclohexane,96% 355-02-2 100G 表面活性劑
緩沖蛋柏胨水增菌液 Nc
FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小腦星形膠質細胞HA-c
L6 大鼠成肌細胞
CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細胞*培養(yǎng)基100mL
SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 人脈絡膜微血管細胞*培養(yǎng)基 100mL
人小腦星形膠質細胞HA-c
FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
L6 大鼠成肌細胞
CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細胞*培養(yǎng)基100mL
SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 人脈絡膜微血管細胞*培養(yǎng)基 100mL
Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg操作步驟人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 ) CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 NCI-N87 human gastric cancer cells [N87] RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL2 Protein Canine 重組狗 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 (147 Cys/Ser)
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
