購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研
| 產品名稱 | HT115(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
COMP 人軟骨寡聚基質蛋白 規(guī)格： 48T/96T
BRCA-2 人蛋白癌易感蛋白2 規(guī)格： 48T/96T
BRCA-1 人蛋白癌易感蛋白1 規(guī)格： 48T/96T
人蛋白癌標志物-CA153ELISA Kit，48T/96T 人蛋白癌標志物-CA153ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
HPV-IgM 人乳狀瘤病毒抗體IgM 規(guī)格： 48T/96T
HPV-IgG 人頭狀瘤病毒抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T
HPV 人頭狀瘤病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T
LF/LTF Ab-Ig 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T
LF/LTF 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格： 48T/96T
LDH 人乳酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T
Hc 人溶血補體 規(guī)格： 48T/96T
HLAMP-2 人溶酶體相關膜蛋白2 規(guī)格： 48T/96T
LZM 人* 規(guī)格： 48T/96T
β-HCG 人絨毛膜*β 規(guī)格： 48T/96T
HCG 人絨毛膜* 規(guī)格： 48T/96T
PAPP-A 人妊相關血漿蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
SP1/PSβ1-G 人妊特異性β1糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HG 人妊皰疹抗體 規(guī)格： 48T/96T
HSF-1 人熱休克因子1 規(guī)格： 48T/96T
HSP gp96 人熱休克蛋白糖蛋白96 規(guī)格： 48T/96T
HSP-90 人熱休克蛋白90 規(guī)格： 48T/96T
HT115(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50HSP-70 人熱休克蛋白70 規(guī)格： 48T/96T
Hsp-60 人熱休克蛋白60 規(guī)格： 48T
shēng huà shì jì 磺酰羅丹明B 容量： 保存：-20℃ 100KU
shēng huà shì jì 磺基* 容量： 2～8℃ 5克
shēng huà shì jì 磺基水楊酸 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 磺丁基-β-環(huán)糊精 容量： 25克
shēng huà shì jì *鈉 容量： 100克
shēng huà shì jì * 容量： 25克
shēng huà shì jì 磺胺甲基嘧啶 容量： 100克
shēng huà shì jì * 容量： 25克
shēng huà shì jì * 容量： 2～8℃ 5克
shēng huà shì jì 煌綠增菌液 容量： 25毫升
shēng huà shì jì 煌綠乳糖膽鹽肉湯 容量： 25克
shēng huà shì jì 煌綠瓊脂 容量： 100毫升
shēng huà shì jì 煌綠黃胺嘧啶瓊脂 容量： 500克
shēng huà shì jì 黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 黃蓍樹膠粉 容量： 25克
/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
