人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)
細胞介紹：
該細胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進展性惡性黑色素瘤 的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細胞可產(chǎn)生黑色素，電鏡檢測發(fā)現(xiàn)細胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對該細胞系的抗體。
細胞培養(yǎng)步驟：
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備 MEM-EBSS 培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle ’ s Balanced Salts) (MEM-EBSS))( MEM，GIBCO,41500034,添加 EBSS)，90%;優(yōu)質(zhì)
胎牛血清，10%
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為95%。
3.凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)細胞傳代：
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO 后進行凍存。
注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
細胞特性：
1)來源：皮膚黑色素瘤
2)形態(tài)：球形，懸浮生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式：（1)干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；（2)存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
