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| 產品名稱 | Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
LH 兔子促黃體激素 規(guī)格： 48T/96T
E2 兔子雌二醇 規(guī)格： 48T/96T
iFABP 兔子腸脂肪酸結合蛋白 規(guī)格： 48T/96T
C3a 兔子補體片斷3a 規(guī)格： 48T/96T
C4 兔子補體蛋白4 規(guī)格： 48T/96T
EGF 兔子表皮生長因子 規(guī)格： 48T/96T
LIFR 兔子白血病抑制因子受體 規(guī)格： 48T/96T
LTB4 兔子白三烯B4 規(guī)格： 48T/96T
IL-4 兔子白介素4 規(guī)格： 48T/96T
IL-3 兔子白介素3 規(guī)格： 48T/96T
IL-2 兔子白介素2 規(guī)格： 48T/96T
IL-1sR Ⅰ 兔子白介素1可溶性受體I 規(guī)格： 48T/96T
IL-1β 兔子白介素1β 規(guī)格： 48T/96T
IL-10 兔子白介素10 規(guī)格： 48T/96T
IL-1 兔子白介素1 規(guī)格： 48T/96T
IFN-γ 兔子γ干擾素 規(guī)格： 48T/96T
β-TG 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
IFN-α 兔子α干擾素 規(guī)格： 48T/96T
S-100 兔子S100蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 S-100B 兔子S100B蛋白 規(guī)格： 48T
shēng huà shì jì 球蛋白抗原豚鼠IgG 容量： 500克
shēng huà shì jì 球蛋白抗原兔IgG 容量： 12毫升
shēng huà shì jì 球蛋白抗原人IgG 容量： 25毫升
shēng huà shì jì 球蛋白抗原牛IgG 容量： 40片/盒
shēng huà shì jì 球蛋白抗原馬IgG 容量： RT 500克
shēng huà shì jì 球蛋白抗原雞IgG 容量： RT 50片/盒
shēng huà shì jì 球蛋白抗原大鼠IgG 容量： 500克
shēng huà shì jì 蚯蚓酶 容量： 25克
shēng huà shì jì 秋水仙胺 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠CL-6B 容量： 2～8℃ 5克
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠CL-4B 容量： 25克
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠CL-2B 容量： 2～8℃ 1KU
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠6FF 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠6B 容量： 20KU
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠4FF 容量： 25克
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠4B蛋白A 容量： 5克
shēng huà shì jì 瓊脂糖凝膠4B 容量： 10毫克
/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
