產(chǎn)品名稱:HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞價格
英文名稱:HK-2in HK-2cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0073
的運(yùn)輸和保存
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞價格視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞價格培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
* 英文名稱: L-Histidine : 71-00-1 分子式: C6H9N3O2 155.15 20mg
植酸鈣 英文名稱: Calcium phytate : 3615-82-5 分子式: C6H6Ca6O24P6 888.41 20mg
植酸鈉 英文名稱: Sodium phytate : 14306-25-3 分子式: C6H6Na12O24P6 923.82 25mg
植酸鋅 英文名稱: Zinc Phytate : 63903-51-5 分子式: C6H6O24P6Zn6 1040.280006 20mg
苯乙酸 英文名稱: Phenylacetic acid : 103-82-2 分子式: C8H8O2 136.15 20mg
胞嘧啶 英文名稱: Cytosine : 71-30-7 分子式: C4H5N3O 111.1 20mg
* 英文名稱: Uracil : 66-22-8 分子式: C4H4N2O2 112.09 20mg
胸腺嘧啶 英文名稱: : 分子式:
* 英文名稱: Acarbose : 56180-94-0 分子式: C25H43NO18 645.6 20mg
* 英文名稱: : 分子式: 20mg
羅* 英文名稱: Roxithromycin : 80214-83-1 分子式: C41H76N2O15 837.05 200mg
* 英文名稱: Azithromycin : 83905-01-5 分子式: C38H72N2O12 748.98 100mg
雌酚酮 英文名稱: "Estrone
" : 53-16-7 分子式: C18H22O2 270.37 20mg
次黃嘌呤 英文名稱: 6-Hydroxypurine : 68-94-0 分子式: C5H4N4O 136.11 20mg
黃嘌呤 英文名稱: 2,6-Dihydroxypurine : 69-89-6 分子式: C5H4N4O2 152.11 20mg
* 英文名稱: Guanine : 73-40-5 分子式: C5H5N5O 151.13 20mg
* 英文名稱: Inosine : 58-63-9 分子式: C10H12N4O5 268.23 20mg
腺嘌呤 英文名稱: Adenine : 73-24-5 分子式: C5H5N5 135.13 20mg
* 英文名稱: Calcium pantothenate : 137-08-6 分子式: C18H32CaN2O10 476.53 20mg
富馬酸 英文名稱: Fumaric acid : 110-17-8 分子式: C4H4O4 116.07 20mg
* 英文名稱: Mannitol : 87-78-5 分子式: C6H14O6 182.17 20mg
骨化二醇 英文名稱: Calcifediol : 63283-36-3 分子式: C27H44O2 400.64 20mg
* 英文名稱: Calcifediol : 19356-17-3 分子式: C27H44O2 400.64 10mg
L-* 英文名稱: L-Tryptophan : 73-22-3 分子式: C11H12N2O2 204.23 20mg
*2 英文名稱: Vitamin B2 : 83-88-5 分子式: C17H20N4O6 376.36 20mg
天冬酰胺 英文名稱: "L-Aspartic acid
" : 56-84-8 分子式: C4H7NO4 133.1 20mg
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞價格*3 英文名稱: Vitamin D3 : 分子式: 20mg
Product Name 英文名稱: Packing : 分子式:
艾葉對照藥材 英文名稱: 1g : 分子式:
八角茴香對照藥材 英文名稱: 1g : 分子式: