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上海撫生實業(yè)有限公司

hanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.

成立于2012年，經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA研發(fā)，代測，技術(shù)服務(wù)這一產(chǎn)品已使上海撫生成為中國公司。

公司產(chǎn)品涵蓋ELISA研發(fā)、細胞培養(yǎng)，各種生化試劑、各種酶類、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海撫生還代理了美國藥典標準品，中檢所標準品，sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產(chǎn)品。

上海撫生將進一步加強人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營，不斷提升企業(yè)的核心竟爭力，實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化的公司，服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域，迎接世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。

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產(chǎn)品簡介在線詢價

產(chǎn)地	進口	加工定制	是	適用領(lǐng)域	科研

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法，冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→（-20℃30分鐘*）→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽*儲存。

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱：小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法
英文名稱：Mediummouseretinal pigment epithelial cells
規(guī)格：100mL
產(chǎn)品貨號：FS-X0522
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱顯微鏡

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