產(chǎn)品名稱:HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)運輸
英文名稱:HEL red and white cells (leukemic cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0835
HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T
HBcAb(Mouse hepatitis B virus core aibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎核心抗體 96T
HBeAb(Mouse hepatitis B virus e aibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗體 96T
sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 96T
F XII ELISA Kit 大鼠*Ⅻ 96T
F X III ELISA Kit 大鼠*ⅩⅢ 96T
TRAIL-R4(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4 96T
HBeAg(Mouse hepatitis B virus e aigen) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗原 96T
TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3 96T
F III ELISA Kit 大鼠*Ⅲ 96T
HBsAb(Mouse hepatitis B virus surface aibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎表面抗體 96T
DAO(Mouse diamine oxidase) ELISA Kit 小鼠二胺氧化酶 96T
Apo-H ELISA Kit 大鼠載脂蛋白H 96T
TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1 96T
TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人腫瘤壞死因子β 96T
HBsAg(Mouse hepatitis B virus surface aigen) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎表面抗原 96T
IL-2R ELISA Kit 大鼠白介素2受體 96T
ENG/sCD105(human Soluble Endoglin) ELISA Kit 人可溶性Endoglin 96T
TNF- Alpha(Human Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 人腫瘤壞死因子α 96T
ADM ELISA Kit 大鼠腎上腺髓質(zhì)素 96T
HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)運輸Beta-EPR ELISA Kit 大鼠β內(nèi)啡肽受體 96T
APC(Mouse activated protein C) ELISA Kit 小鼠活化蛋白C 96T
TNFsR- II (Human Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T
CAMK 2 ELISA Kit 大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2 96T
a-Glu(Mouse Alpha-Glucosidase) ELISA Kit 小鼠α葡萄糖苷酶 96T
TNFsR- I (Human Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA