人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨期 |
貼壁生長(zhǎng) | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來(lái)。NCI-H295細(xì)胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細(xì)胞,群體倍增時(shí)間從原來(lái)的5天減為2天。NCI-295細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),而NCI-H295R呈單層貼壁生長(zhǎng)。NCI-H295R細(xì)胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對(duì)血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) Nu-Serum I, 2.5%;15 mM HEPES+0.00625 mg/ml insulin+0.00625 mg/ml transferrin+6.25 ng/ml selenium+1.25 mg/ml bovine serum albumin+0.00535 mg/ml linoleic acid
傳代方法 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:32.2;D2S1338:25;D3S1358:15,16;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:13;FGA:19.2,24;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0250801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腎上皮細(xì)胞cDNAHREpiC cDNA
豬細(xì)胞;ST 單核巨噬細(xì)胞白血病,RAW 264.7細(xì)胞 L615細(xì)胞,615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus
貓?jiān)醇?xì)胞
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106)
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人角膜細(xì)胞總RNAHK tRNA
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0250801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎上皮細(xì)胞cDNAHREpiC cDNA
豬細(xì)胞;ST 單核巨噬細(xì)胞白血病,RAW 264.7細(xì)胞 L615細(xì)胞,615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Anti-PS-1/FITC 熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum 兔抗小鼠k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
白介素4抗體 Anti-IL-4 0.1ml
Rabbit anti-Guinea pig IgG whole serum 兔抗豚鼠IgG抗血清 1ml
Phospho-FGFR1 (Tyr154) 英文名稱: 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum 兔抗小鼠k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Muc-1/CD227 Anti-gen (mucin-1) 粘蛋白-1/上皮膜抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Anthrax 炭疽桿菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Bax(Ser184) 磷酸化Bax抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗人 IgA/FITC 0.2ml 綠色熒光,Dako公司
VWCE 英文名稱: VWCE抗體 0.2ml
DIRAS2 英文名稱: DIRAS2蛋白抗體 0.2ml
Anti-Anthrax 炭疽桿菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)Sec8 英文名稱: 胞吐分泌蛋白Sec8抗體 0.2ml
EDRF1 英文名稱: 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體 0.2ml
組織蛋白酶H抗體 Anti-cath-H/CH 0.1ml
Anti-UMOD/FITC 熒光素標(biāo)記UMOD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格 0.1ml
CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。