人肝癌細胞；BEL-7402培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 人肝癌細胞；BEL-7402培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標本中建立的。 細胞群體倍增時間為20小時。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。 細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維，與臨床肝癌細胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時，其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細胞的染色體數(shù)為不足三倍體，有一個異常的近端著絲點染色體。 間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同，而與人胚肝及臨床肝癌相近。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:15,18；D5S818:12；D7S820:12；D8S1179:12；FGA:18,21；TH01:7；TPOX:12；vWA:16,18
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人肝癌細胞；BEL-7402培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
人角膜細胞cDNAHK cDNA
豬腎細胞;PK(15) 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞，NK-92MI細胞 U27細胞，KM小鼠子瘤株
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human
大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6
小鼠骨髓間充質(zhì)肝細胞(MMSC-bm)(5×105)
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡(luò)膜血管細胞*培養(yǎng)基 100mL
人虹膜色素上皮細胞cDNAHIPEpiC cDNA
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
牛腎細胞;MDBK(NBL-1)
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
SGC-7901人胃腺癌細胞 SGC-7901 human gastric cancer cells 1640+10% FBS
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白 (His 標簽)
人食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus
Tgar
KAgar
EC 肉湯 E.Coli Broth 250 用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標準)
中國藍瓊脂250g/瓶用于腸道致病菌的選擇性分離incubationmedia中國藍瓊脂250g/瓶用于腸道致病菌的選擇性分離
PlateCountAgar
Koser氏枸椽酸鹽肉湯2200g用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗
6201-prf CMM-prf 心肌細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 6201-prf CMM-prf 心肌細胞培養(yǎng)基 500 ml
Sabouraud’sGlucoseAgarMedium
DNA酶瓊脂于核糖核酸酶檢測
BM液體培養(yǎng)基 250g 用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
人肝癌細胞；BEL-7402培養(yǎng)纖維素剛果紅培養(yǎng)基250g用于檢測纖維分解微生物
*鹽瓊脂 *的選擇性分離培養(yǎng) 500g incubation media *鹽瓊脂 *的選擇性分離培養(yǎng) 500g
毛殼 支/瓶
含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋用于空腸彎曲菌的前增菌
RCSalmonellaEnrichmentMedium
人肝癌細胞；BEL-7402培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
