細(xì)胞名稱 人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 SK-HEP-1細(xì)胞系已被鑒定為內(nèi)皮來(lái)源。 該細(xì)胞系為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。 在裸鼠中,它能形成與肝癌相*的大細(xì)胞癌。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
COLEC12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-H087人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人食道上皮細(xì)胞HEEpiC
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C 人膀胱癌細(xì)胞,5637細(xì)胞 BEL-7402(肝癌細(xì)胞)
人癌細(xì)胞;MDA-MB-453
GFRA2 Others Human 人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人男性正常細(xì)胞;Hs68
人膀胱平滑肌細(xì)胞RNAHBdSMC miRNA5 μg
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF 肝癌細(xì)胞,Hep 3B2.1-7細(xì)胞 IR983F細(xì)胞,大鼠骨髓瘤細(xì)胞
CL-0454TE-11(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人羊膜上皮細(xì)胞cDNAHAmEpiC cDNA
TERF1 Others Human 人 TERF1 / TRF1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性);NRK49F
AGS細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,TU 686細(xì)胞 大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6
TREM2 Others Human 人 TREM2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
酚紅葡萄糖肉湯250g用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) Violet Red Bile Agar 用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)(GB2008、SN標(biāo)準(zhǔn))
甲基紅指示劑盒 10ml*1 用于甲基紅試驗(yàn)配套試劑
葡萄糖肉湯250g/瓶用于溶血性鏈球菌增菌incubationmedia葡萄糖肉湯250g/瓶用于溶血性鏈球菌增菌
*麥康凱瓊脂添加劑 1ml*5 每200mlHB0121培養(yǎng)基中添加1支(含*0.01mg和亞碲酸鉀0.5mg)
李氏增菌肉湯基礎(chǔ)(LB)26040250g用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB4789.30-2010)。
C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (CM0301) Oxoid incubation media C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (CM0301) Oxoid
善變副球菌 支/瓶
平板計(jì)數(shù)肉湯(PCB)250g用于濾膜法計(jì)數(shù)菌落總數(shù)
BrothmediumG(MacConkeybroth)
人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1培養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基250g用于測(cè)量磷細(xì)菌肥料中磷細(xì)菌的總數(shù)
Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U*,10000ug*和29.2mg*,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U*,10000ug*和29.2mg*,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml
紅曲霉 食用 支/瓶
SalmonellaShigellaAgar
麥芽汁培養(yǎng)基 250g 用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)