產(chǎn)品名稱 | OKT11小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞 | 貨號 | A01X1092 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | OKT11:OKT11 |
分類 | 小鼠細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 小鼠B淋巴細(xì)胞，小鼠淋巴瘤細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | OKT 11細(xì)胞是一株用人的T細(xì)胞白血病細(xì)胞(急性淋巴細(xì)胞白血病)對小鼠進(jìn)行免疫，然后將免疫的小鼠脾細(xì)胞與P3X63Ag8.U1骨髓瘤細(xì)胞融合而建立的細(xì)胞系。免疫球蛋白；單克隆抗體；抗人T細(xì)胞(人T淋巴細(xì)胞)和人E玫瑰花環(huán)反應(yīng)陽性胸腺細(xì)胞(人胸腺淋巴細(xì)胞)；抗CD2。 |
生長培養(yǎng)基 | IMDM＋20% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 3×10^5-5×10^5cells/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
注意事項(xiàng) | 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請注意離心收集細(xì)胞懸液；請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。 |
產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鼠李糖發(fā)酵管5ml 30 支/盒 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基200ml
血鏈球菌 淺灰鏈霉菌杭州變種
蘇云金芽胞桿菌殺蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus 嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌
產(chǎn)紫青霉 小紅酵母
南方樹舌 土星漢遜酵母
銅綠假單胞菌凍干粉 耐久腸球菌(堅(jiān)韌鏈球菌)
構(gòu)巢裸胞殼 保加利亞乳桿菌
沼澤紅假單胞菌 膠紅酵母
細(xì)黃鏈霉菌 橄欖包毛殼
干酪乳桿菌干酪亞種 香蕉枯萎病
特異青霉 嗜熱脂肪桿菌ATCC 7953
炭球菌 枯草桿菌黑色變種芽孢菌ATCC 9372
克柔念珠菌凍干粉 嗜熱乳酸鏈球菌AS1.1864凍干粉
OKT11小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞立枯多核菌 熏衣草灰鏈霉菌
耐鹽芽孢桿菌 球毛殼
生孢梭菌（產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌） 健強(qiáng)地霉
白黃鏈霉菌 地生翅孢殼
泛養(yǎng)副球菌 類干酪乳桿菌類干酪亞種
萄球菌ATCC43300凍干粉 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基70mm
擬康氏木霉 球型芽孢桿菌
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
