產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞；2V6.11 | 貨號 | AXB10252 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | 2V6.11：2V611 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，胎兒 |
組織來源 | 腎；用腺病毒5(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化；用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | 2V6.11細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293 [HEK-293]衍化而來，293 [HEK-293]細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細(xì)胞。隨后，用包含編碼E4 24K的Ad5 E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來，載體包含SV40病毒序列。2V6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測；2V6.?脀? |
生長培養(yǎng)基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2784 ATCC; JHU-67 |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-C/EBP Beta/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 小鼠粘蛋白/粘液素5B 96T
LEO1 英文名稱： RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 0.1ml
APOC3 英文名稱： 載脂蛋白C3抗體 0.2ml
Anti-C/EBP Beta/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC 熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DLK1 穿膜蛋白DLK1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human IgA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgA 0.1ml
LEO1 英文名稱： RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 0.1ml
苯唑青檢測試劑盒 96孔/盒 動(dòng)物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶
Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC 熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
E2 ELISA KIT 魚雌二醇Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)0蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CYP46 24S-羥化酶 規(guī)格 0.2ml
Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對照) 0.1ml
Lens culinaris agglutinin 英文名稱： 扁豆凝集素 0.2ml
Rhesus antibody Rh YES1 原癌基因酪蛋白激酶Yes1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)0蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit 小鼠肌紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標(biāo)記Cullin 4a蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞；2V6.11Rhesus antibody Rh DCUN1D2 DCN1樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
Horse IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記馬IgM 0.1ml
L-ENK 英文名稱： 亮酸腦啡肽抗體 0.1ml
類藥單克隆抗體 小鼠單抗 1
Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標(biāo)記Cullin 4a蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
