公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 貨號 | A01X889 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | NCIH446:NCI-H446 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
種屬 | 種屬人 |
年齡（性別） | 男；61歲 |
組織來源 | 肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細(xì)胞肺癌 |
生長特性 | 貼壁/懸浮 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | NCI-H446細(xì)胞是從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。NCI-H446細(xì)胞是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細(xì)胞內(nèi)脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測水平。C-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍，c-myc RNA比正常細(xì)胞增加15倍。最初，傳代培養(yǎng)基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氫化、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml鐵傳遞蛋白、大鼠細(xì)胞系 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
培養(yǎng)條件氣相 | 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
FN ELISA Kit 大鼠纖連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Bax/FITC 熒光素標(biāo)記Bax抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EST1A 端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體 規(guī)格 0.2ml
sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor) ELISA Kit 人可溶性壞死因子α受體 96T
MICB 英文名稱： MHC I類鏈相關(guān)蛋白B 0.1ml
AEBP1 英文名稱： 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 0.2ml
Anti-Bax/FITC 熒光素標(biāo)記Bax抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit 小鼠因子ⅨMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CR1/CD35/FITC 熒光素標(biāo)記Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Duck salmonella 鴨沙門氏菌抗體 規(guī)格 0.2ml
COX IgM I 柯薩奇病毒 IgM Ⅰ(間接法二步法)
MICAL1 英文名稱： 酪酸單氧化酶微管相關(guān)蛋白MICAL抗體 0.1ml
ANKRD22 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 0.2ml
Anti-CR1/CD35/FITC 熒光素標(biāo)記Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LH ELISA Kit 大鼠促黃體激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC 熒光素標(biāo)記ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FABP5 脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮細(xì)胞型) 規(guī)格 0.1ml
CDl4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD14分子 96T
MICA 英文名稱： MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體 0.1ml
ACTR 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶ATR抗體 0.1ml
Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC 熒光素標(biāo)記ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
(Mouse anti-IgE receptor antibody) ELISA Kit 小鼠抗IgE受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD80/B7-1/FITC 熒光素標(biāo)記刺激分子B7-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPCR1 DPCR1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CA153 癌相關(guān)抗原 96T
MICA 英文名稱： MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體 0.1ml
AMIGO3 英文名稱： 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml
Anti-CD80/B7-1/FITC 熒光素標(biāo)記刺激分子B7-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PAL ELISA Kit 大鼠L苯丙解氨酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AMPK beta-1(phospho Ser182) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞大、小鼠0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FasL/CD178 兔抗FasL抗體。 規(guī)格 0.1ml
Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H 96T
MIC1 英文名稱： 結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體 0.2ml
phospho-APC1 (Ser377) 英文名稱： 0酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 0.1ml
Anti-AMPK beta-1(phospho Ser182) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
