細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作
TE-1人食管癌細(xì)胞
英文名稱 | TE1:TE-1 | 貨號 | A01X994 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
商品介紹：
別稱 | TE1 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 食管癌 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~60小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：
一、概念不同
1、細(xì)胞株：細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株（Cell Strain）。
2、細(xì)胞系：細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
二、形成方法不同
1、細(xì)胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系：經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機，原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細(xì)胞系。
三、細(xì)胞的延續(xù)性不同
1、細(xì)胞株：原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系：細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機”，不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類：
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù)，降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
交叉污染的確認(rèn)
為細(xì)胞換液時，要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入，而不是直接加到細(xì)胞中，以免損傷細(xì)胞，當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。
細(xì)胞傳代的時間把握
當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖，貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴增空間，或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力，無法進一步生長時，細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平，以便細(xì)胞繼續(xù)生長，并且刺激進一步增殖，必須對細(xì)胞進行傳代。
細(xì)胞培養(yǎng)的步驟：
細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致，例如：培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì)，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴(yán)重時將會成為不可逆的變化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
乳酸乳球菌乳酸亞種 高羊肚菌 Morchella elata
蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki 營養(yǎng)瓊脂(NAP)[肉湯瓊脂平板][空氣平皿]90mm
兩型孢毛霉 律賓鏈霉菌
斑褶菇 糖化酵母
小被孢霉 乳酸鏈球菌
乳酸片球菌 根霉屬的菌
表皮葡萄球菌ATCC12228凍干粉 直立毛霉
雅致枝霉 紅串紅球菌
紅法夫酵母 凸圓靈芝(白芝)
鼠傷寒沙門菌凍干粉 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基70mm
乳酸鏈球菌 大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 帶有YIplac211穿梭質(zhì)粒
亞膜漢遜酵母 三七根腐病菌 Cylindrocarpon sp.
長野解普魯蘭桿菌 皺木耳
普通變形桿菌AS1.1527凍干粉 婁地青霉
扣囊內(nèi)孢霉 小被孢霉
TE-1人食管癌細(xì)胞乳鏈球菌 郎比可假絲酵母
谷酸棒桿菌 耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)
改良馬丁培養(yǎng)基40ml 玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基70mm
米黑根毛霉 保加利亞乳桿菌
蘇云金芽胞桿菌東北亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tohokuensis 北京棒桿菌
