公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63278
商品介紹:
測定意義 AsA作為植物細(xì)胞一個重要生理指標(biāo),其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內(nèi),與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng),具有電子受體的作用。 測定原理: DTT還原DHA生成AsA,通過測定體系中AsA的生成速率,即可計算出DHA含量。 自備儀器和用品: 低溫離心機(jī)、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
胸苷激1熒光Cy3標(biāo)記豬IgGThymidine Kinase 1
N-6-腺特異性DNA甲基轉(zhuǎn)移1熒光Cy3標(biāo)記水貂IgGN-6-Adenine Specific DNA Methyltransferase 1
抗壞血過氧化物熒光Cy3標(biāo)記兔IgMAscorbate peroxidase
β-1,3-葡聚糖熒光Cy3標(biāo)記大鼠IgMβ-1,3 glucanase
丁型肝炎IgM抗體熒光Cy3標(biāo)記重組白介-1受體拮抗劑Hepatitis D virus IgM
白細(xì)胞介36α熒光Cy3標(biāo)記血藍(lán)蛋白Interleukin 36α
白細(xì)胞介36β熒光Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白Interleukin 36β
血管內(nèi)皮生長因子受體2熒光Cy3標(biāo)記血白蛋白Vascular endothelial cell growth factor receptor 2
肌漿;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP熒光Cy3標(biāo)記胰糜蛋白SERCA ATPase
細(xì)胞色P4503A4Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Cytochrome P4503A4
糖基轉(zhuǎn)移Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)Glycosyl Transferases
腦啡肽熒光PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)enkephalin
抗肌炎抗體譜3抗體IgG辣根過氧化物標(biāo)記生物MSA3-IgG antibody
心型脂肪結(jié)合蛋白(親和純化) 牛IgGheart fatty acid binding protein
半胱蛋白抑制劑;胱抑C熒光標(biāo)記牛血清白蛋白Cystatin C
DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品(R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯(lián)膦基)二茂鐵乙 97%Anti-EXPB-2/FITC 熒光標(biāo)記植物延展-βIgG
鹽 BP2007,藥用級(1R,2R)-二[(2-甲氧基基)基磷]乙烷 97%Anti-Ezrin/Radixin/FITC 熒光標(biāo)記埃茲蛋白抗體IgG
葡聚糖40 分子量40000(R)-(+)-2,2'-聯(lián)[二-(4-基)膦基]-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG
5'-腺核苷二鈉鹽 99%(R)-(+)-2,2'-二(二-3,5-基膦)-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG
腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%rac-2-(二叔丁基膦)-1,1′-聯(lián)萘 98%Anti-Fabp2 /FITC 熒光標(biāo)記脂肪結(jié)合蛋白2抗體IgG
腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%,用于培養(yǎng)(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%Anti-FABP(brain)/FITC 熒光標(biāo)記腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgG
核苷5’-一磷腺苷鈉鹽 99%(R)-(+)-2-[2-(二基膦)基]-4-異基二惡唑 98%Anti-factor V/FITC 熒光標(biāo)記5抗體IgG
抑肽 3-8 TIU/mg(R)-(+)-1,1'-(二基膦基)烷 98%Anti-factor VIII/FITC 熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG