公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | HGF人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human hepatocyte growth factor, HGF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63287 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
Hyphomonasrosenbergii HyphomonasrosenbergiiHyphomonasrosenbergii分離基物:海熱排氣,瓜伊馬斯流域,墨西哥灣安全等級(jí):1模式菌株:102生長(zhǎng)條件:26℃ 純度:98%
Ohtaekwangiakoreensis OhtaekwangiakoreensisOhtaekwangiakoreensis分離基物:沙灘,韓國(guó)安全等級(jí):1模式菌株:108生長(zhǎng)條件:30℃ 純度:98%
Fusobacriumnecrophorumsubsp.necrophorum 壞死梭桿菌壞死亞種Fusobacriumnecrophorumsubsp.necrophorum安全等級(jí):1模式菌株:35、122.厭氧生長(zhǎng)條件:37℃ 純度:98%
Corynebacriumglutamicum=Brevibacriumflavum 谷氨棒狀桿菌(黃色短桿菌)Corynebacriumglutamicum=Brevibacriumflavum分離基物:從ATCC14067衍生安全等級(jí):1模式菌株:noL-精氨2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度:98%
Vibriocholerae 霍亂弧菌Vibriocholerae安全等級(jí):1模式菌株:no129生長(zhǎng)條件:37℃ 純度:98%
Burkholderia cepacia 洋蔥伯克霍爾德氏菌Burkholderia cepacia凍干安全等級(jí):1模式菌株:,抗菌防腐劑的含量測(cè)定,培養(yǎng)基:測(cè)試,產(chǎn)洋蔥伯克菌素,質(zhì)量控制菌株?duì)I養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:30℃,好氧 純度:97%
Raoulla rrigena=Klebsiella rrigena 土生拉烏爾菌(土生克雷伯菌)Raoulla rrigena=Klebsiella rrigena分離基物:活性污泥凍干安全等級(jí):1模式菌株:no降低三聚胺121生長(zhǎng)條件:26℃ 純度:97%
Pseudomonascitronellolis 香茅醇假單胞菌Pseudomonascitronellolis分離基物:除草劑泄漏的土壤,美國(guó)安全等級(jí):1模式菌株:no104、109、121生長(zhǎng)條件:28℃ 純度:98%
HGF人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Salmonella agar acc.to ONOZ 沙門氏菌瓊脂人晶狀體上皮cDNA二芐基二硫Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT 沙門氏菌富集肉湯人虹膜色素上皮cDNA二芐基二硫Calcitonin 降鈣素抗原
Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT-VASSILIADIS( RVS)人結(jié)膜成纖維cDNAN,N'-二苯基乙二胺CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結(jié)合蛋白1抗原
沙門氏菌富集肉湯人無色素睫狀上皮 cDNAN,N'-二苯基乙二胺CTLA-4/CD152 淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4
Salmosyst broth base Salmosyst 肉湯基礎(chǔ)人梁網(wǎng)cDNA托伐普坦CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
Salmosyst selective supplement tablets Salmosyst選擇添加片人羊膜上皮cDNA5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯Cx32(Connexin-32) 間隙連接蛋白32抗原
Selective agar for pathogenic fungi致病真菌選擇瓊脂人滋養(yǎng)層絨毛cDNA5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯CX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原
Selenite cystine enrichment btoth for microbiology人絨毛間葉成纖維cDNA6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯Cx40 (Connexin-40) 間隙連接蛋白40(多肽)