備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?/span> 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?/span> 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?/span>1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit |
貨號(hào) | BJ-G9764 |
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶(hù)要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀(guān)察成像: 顯微鏡下觀(guān)察成像。
HPAC細(xì)胞,人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細(xì)胞,T6細(xì)胞 雜交瘤(B類(lèi));C3110D2E11梣酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Fraxinellone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2茶黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Theaflavin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml茶黃素-3'-沒(méi)食子酸酯Theaflavin-3'-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA茶黃素-3-沒(méi)食子酸酯Theaflavin-3-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 柴胡皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Saikosaponin A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Glycerokinase甘油激酶100克BR,5′d(NNN NNN NNN N)3′
CL-0141LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×23,5-二甲基-2-... 3,5-Dimethylpyrrole-2-carboxaldehyde,95% 2199-58-8 1G 通用試劑
B16-F1細(xì)胞,鼠色素瘤細(xì)胞系 血細(xì)胞瘤細(xì)胞系,Ramos細(xì)胞 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11四拂硼醋 Fluoroboric ccid 1687-11-0
AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23-O-甲基-D-葡萄糖,英文名或英文縮寫(xiě):3-O-metxylglucose,級(jí)別:BR,兔肝提取,規(guī)格:1克
CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硅酮彈性體 IVNA
TE-10(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HCC1428(人癌細(xì)胞)L-天冬酸shēng huà shì jì容量:100克
CM-M052小鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL2-3-(4-本酰本酰)腺苷 5-三鱗醋三銨鹽(-20°C) 2'- cND 3'-O-(4-BqNZOYLBqNZOYL)-cDqNOSINq 5'-TRIPHOSPHcTq TRIqTHYLcMMONIUM ScLT 11898-12-4
OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二鈉shēng huà shì jì容量:RT500克
神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prfwo7iumPHOSPHATE,DIBASIC,HEPTAHYDRATE嶙酸氫二鈉,七水ACS級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
SiHa細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠血細(xì)胞,WEHI-3細(xì)胞 子宮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)56-49-53-甲基膽 98%3-metxYLCHOLANTHRENE
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)elisa進(jìn)口試劑盒SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7洛伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Lovastatin,Monacolin K質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HFL-I細(xì)胞,胚肺成纖維細(xì)胞 人小腸癌細(xì)胞系,HIC細(xì)胞 CM-R061大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL盧比前列腺素/盧比前列酮Lubiprostone質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠肝癌細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]賴(lài)氨酸加壓素;賴(lài)氨加壓素Lypressin Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸M肽Matrixyl Acetate質(zhì)量規(guī)格:>95%脂溶性的
人心肌細(xì)胞-cDNAHCM-a cDNA鹽酸甲氯芬酯Meclofenoxate HCl質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測(cè),全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn),索取產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。