Benzonase 核酸酶
商品屬性：
產(chǎn)品分類(lèi) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
蛋白相關(guān) | 25KU | BJ-PJ6660 |
蛋白相關(guān) | 10000ku | BJ-PJ6660 |
商品介紹：
是來(lái)自經(jīng)基因工程改進(jìn)的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式(包括單鏈，雙鏈，線性和環(huán)狀)的 DNA 和 RNA 而沒(méi)有蛋白裂解活性，在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸消化成3-5 堿基長(zhǎng)度（雜交限度以下）的 5’-單磷酸寡核苷酸，從重級(jí)蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量的選擇。該酶與BacReady-Protein Extraction Solution和RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提試劑配合使用，從而消除粗提物中的核酸，降低粘度。
單位定義：在 30 分鐘內(nèi)使△A260 值降低 1.0(相當(dāng)于消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用
蛋白提取時(shí)去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲(chǔ)存：置于-20°C 保存。
操作方法
1. 組織處理方法：將 30-50mg 動(dòng)植物組織研磨充分后，加入 100-200 μl RIPA 裂解液，同時(shí)加入 1 μl，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
2.細(xì)胞處理方法：將 106-107懸浮細(xì)胞液 6,000 rpm 離心10min 后，棄掉上清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細(xì)胞，同時(shí)加入 1μl ，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。注意：貼壁細(xì)胞重懸于 PBS 后，處理方法同懸浮細(xì)胞。
3. 大腸桿菌細(xì)胞處理：將 500 μl E.coli 培養(yǎng)液 8,000rpm 離心 5min 后，棄掉上清液，使用 100 μl 大腸桿菌裂解液重懸細(xì)胞，同時(shí)加入 1μl ，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后，將裂解產(chǎn)物于 13,000 rpm 離心 10min后，取上清即為提取蛋白（包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白）。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
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