ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | COX-2裸鼠環(huán)加氧酶2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Nude mouse cyclooxygenase-2, COX-2 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-N64706 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
白介素8抗體英文全稱corticotropin releasing hormone receptor英文簡(jiǎn)稱CRHR1檢測(cè)范圍5540nmol/L-10ng/ml
IKK激酶相互作用蛋白抗體英文全稱corticotropin releasing hormone receptor英文簡(jiǎn)稱CRHR2檢測(cè)范圍5541nmol/L-20ng/ml
細(xì)胞間粘附分子-2抗體英文全稱methylenetetrahydrofolate reductase英文簡(jiǎn)稱MTHFR檢測(cè)范圍5542nmol/L-40U/L
整合素αE抗體Integrin αE英文全稱Autophagy Related Protein 16 Like Protein 1英文簡(jiǎn)稱ATG16L1檢測(cè)范圍5543nmol/L-16ng/mL
白介素15抗體英文全稱Immunity-related GTPase family M protein英文簡(jiǎn)稱IRGM檢測(cè)范圍5544nmol/L-2000pg/mL
整合素β2/Integrin β2抗體英文全稱Corticosteroid Binding Globulin英文簡(jiǎn)稱CBG檢測(cè)范圍5545nmol/L-160ug/mL
免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體英文全稱Lymphoid enhancer-binding factor 1英文簡(jiǎn)稱LEF1檢測(cè)范圍5546nmol/L-3200pg/mL
抗重組胰島素抗體英文全稱Glutamate NMDA receptor subunit epsilon-2英文簡(jiǎn)稱GRIN2B檢測(cè)范圍5547nmol/L-2000pg/ml
豬胰島素單克隆抗體英文全稱Glutamate NMDA receptor subunit epsilon-1英文簡(jiǎn)稱GRIN2A檢測(cè)范圍5548nmol/L-2400pg/ml
KB抑制蛋白激酶α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體英文全稱KLK英文簡(jiǎn)稱KLK檢測(cè)范圍5549nmol/L-200U/L
磷酸化肌聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體英文全稱Plasmin英文簡(jiǎn)稱PL檢測(cè)范圍5550nmol/L-80U/L
胰島素受體抗體英文全稱Prosaposin英文簡(jiǎn)稱PSAP檢測(cè)范圍5551nmol/L-8ng/mL
胰島素受體α抗體英文全稱TGF-beta-inducible early response gene-1英文簡(jiǎn)稱TIEG1檢測(cè)范圍5552nmol/L-1000pg/ml
整合素α4抗體英文全稱CCAAT Enhancer Binding Protein 1英文簡(jiǎn)稱CEBP-1檢測(cè)范圍5553nmol/L-10ng/mL
整合素β3抗體英文全稱Elastase英文簡(jiǎn)稱Elastase檢測(cè)范圍5554nmol/L-80U/L
白介素-16抗體英文全稱Sirtuin 3英文簡(jiǎn)稱SIRT3檢測(cè)范圍5555nmol/L-240U/L
人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) Antibody20 ul
人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) Antibody100 ul
人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)100 ul
人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒DYRK1B Antibody100 ul
人抑制素(INH)ELISA試劑盒Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody20 ul
人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody100 ul
人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒Zap-70 (99F2) Rabbit mAb100 ul
人流感病抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒Zap-70 (136F12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
COX-2裸鼠環(huán)加氧酶2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Penicillium raistrickii
大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
人巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
鼠巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Arthrobacter arilaitensis
大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Sporosarcina sp.
人巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Candida kefyr
鼠巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Isaria fumosorosea
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
