ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
激肽釋放酶10ELISA試劑盒免費包郵 | Kallikrein 10 | FS-P65372 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
HEATR4蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3-氨乙酰苯人參皂苷F3(標準品)
透明質(zhì)及粘蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 2,2-二溴-2-乙酰人參皂苷F4,人參皂苷Rg4(標準品)
轉錄因子HES7抗體產(chǎn)品別名: 2-甲氧-4-酚人參皂苷F5(標準品)
宮頸黏液蛋白相關蛋白抗體產(chǎn)品別名: 異戊酯人參皂苷Rb1(標準品)
流感病H3N8血凝素抗體產(chǎn)品別名: 4--2-甲氧苯人參皂苷Rb2(標準品)
流感病H3N7血凝素抗體產(chǎn)品別名: 芐酯人參皂苷Rb3(標準品)
流感病H3N1血凝素抗體產(chǎn)品別名: 2,6-二氟苯乙烯人參皂苷Rc(標準品)
同源盒蛋白HoxB3抗體產(chǎn)品別名: 3-(二氟甲)-5-甲-1H-吡唑人參皂苷Rd(標準品)
遺傳性血色病蛋白相關蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 異丁二二乙酯人參皂苷Rd2(標準品)
甘油吸收/轉運蛋白GUP1抗體產(chǎn)品別名: N-(對羥苯)-2-萘人參皂苷Re(標準品)
HHIP蛋白抗體產(chǎn)品別名: 乙酰乙酰對苯人參皂苷Rf(標準品)
亞鐵氧化酶抗體產(chǎn)品別名: 4'--4-氨二苯人參皂苷Rg1(標準品)
鳥苷釋放因子p532蛋白抗體產(chǎn)品別名: 單氟磷鈉人參皂苷Rg2(標準品)
HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體產(chǎn)品別名: 磺酰人參皂苷Rh1(標準品)
HERC3 E3泛素蛋白連接酶抗體產(chǎn)品別名: [1,3-雙(2,4,6-三)-2-咪唑烷亞][2-[[(4-)亞氨]甲]-4人參皂苷Rh3(標準品)
激肽釋放酶10ELISA試劑盒免費包郵Human MAZ (Myc-associated zinc finger protein) ELISA KIT少孢酵母拉丁屬名: Saccharomyces exiguus
Human MOB2 (MOB kinase activator 2) ELISA KIT*雞油菌都不能訂購拉丁屬名: Cantharellus cibarius Fr.
Human MDGA1 (MAM domain-containing glycosylphosphatidylinositol anchor protein 1) ELISA KIT突臍蠕孢菌用途: 研究
Human MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) ELISA KIT雀黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces canarius
Human PRX(Periaxin) ELISA Kit鏈格孢拉丁屬名: Alternaria sp.
Human MKX(Homeobox protein Mohawk) ELISA Kit克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Candida krusei
Human MARCO (Macrophage receptor MARCO) ELISA KIT楊齒白木層孔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit大腸桿菌用途: 教學科研,構建大腸桿菌野生型的突變株。
Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT淡紫擬青霉用途: 用作生物防治研究
Human SEMG1(Semenogelin-1) ELISA Kit菜豆間座殼注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準